特应性皮炎患者B淋巴细胞上CD200分子表达与针对储藏螨、动物和霉菌分子成分的特异性IgE水平之间的关联

《Journal of Immunotoxicology》：Association between CD200 molecule expression on B lymphocytes and levels of specific IgE against molecular components of storage mites, animals and molds in atopic dermatitis patients

本研究探讨CD200分子在B淋巴细胞上的表达与尘螨、犬类、猫类等过敏原特应性IgE水平的关系，发现未经dupilumab治疗的AD患者CD200与IgE相关性低（≤10%），而治疗后呈现非线性负相关，提示可能存在免疫调节机制差异。

　　在本研究中，我们探讨了B细胞表面CD200分子表达与患者在特应性皮炎（AD）中针对多种过敏原分子成分的特异性IgE水平之间的关系。研究对象包括46名AD患者，其中26人未接受dupilumab治疗，20人接受了至少18个月的dupilumab治疗。通过使用ALEX2 Allergy Xplorer诊断微阵列技术测定特异性IgE水平，并利用流式细胞术评估B细胞表面CD200的表达情况，研究揭示了CD200与IgE水平之间关联性的变化，特别是在dupilumab治疗背景下。

CD200是一种在多种免疫细胞上表达的膜蛋白，包括B细胞、T细胞、树突状细胞和神经元。它通过与CD200R受体相互作用，调节免疫反应，促进免疫耐受，从而防止过度的炎症反应。CD200的表达水平与免疫系统的平衡密切相关，较低的CD200表达可能与自身免疫疾病的发生有关。此外，CD200在过敏性疾病中的潜在治疗价值也得到了实验模型中的初步验证。例如，在实验中，重组CD200被发现可以有效减少气道高反应性，这提示其在调节过敏反应中的重要性。

在AD患者中，CD200的表达被认为可能影响免疫系统的活动，从而减轻AD中观察到的过度免疫激活现象。然而，此前的研究显示，AD患者中B细胞的CD200表达水平普遍较高，无论是否接受dupilumab治疗。这一发现引发了关于CD200在AD中的具体作用机制的讨论。dupilumab作为一种针对IL-4和IL-13信号通路的单克隆抗体，已被批准用于治疗多种类型2炎症性疾病，包括AD、哮喘、慢性鼻窦炎伴鼻息肉、结节性痒疹和嗜酸性粒细胞性食管炎。它通过阻断这些炎症因子的作用，调节免疫反应，减轻AD的临床症状。

本研究旨在进一步探讨CD200在B细胞上的表达与AD患者中特异性IgE水平之间的关系。特异性IgE是过敏反应中的关键免疫分子，其水平与过敏原的敏感性密切相关。因此，了解CD200与IgE之间的关系可能有助于揭示AD的免疫机制，并为潜在的治疗策略提供依据。然而，目前尚无研究系统评估B细胞CD200表达与针对各种过敏原分子成分的特异性IgE水平之间的关联性。

研究采用的样本量为46名AD患者，其中未接受dupilumab治疗的患者26名，接受治疗的患者20名。所有参与者均根据年龄、性别和AD严重程度进行匹配。研究过程中，所有患者均接受全面的皮肤科检查，诊断依据为Hanifin-Rajka标准。研究对象的年龄范围在14岁以上，且未接受系统性治疗（如环孢素、系统性糖皮质激素）。AD的严重程度通过SCORAD（特应性皮炎评分）和EASI（湿疹面积和严重程度指数）系统进行评估，而生活质量则通过DLQI（皮肤病生活质量指数）进行测量。

对于CD200表达的评估，研究使用了流式细胞术。所有患者均在特定时间点采集血液样本：未接受dupilumab治疗的患者在常规随访期间采集样本，而接受治疗的患者则在dupilumab治疗的第18个月采集样本。采集的血液样本使用乙二胺四乙酸（EDTA）作为抗凝剂，以确保样本的稳定性。通过荧光标记的单克隆抗体，研究人员能够分析B细胞表面的CD200表达水平，并进一步区分记忆B细胞、未成熟B细胞、转换B细胞和未转换B细胞等B细胞亚群。流式细胞术分析的结果显示，CD200的表达水平与IgE水平之间的关联性较低，尤其是在未接受dupilumab治疗的AD患者中，这种关联性主要集中在10%以内，其中对Fel d 1（猫过敏原）的特异性IgE与CD200的关联性最高，达到了10.1%。

在dupilumab治疗的AD患者中，CD200与IgE水平之间的关系呈现出非线性特征，即Spearman相关系数常常为负值，表明两者之间存在反向关系。这一发现可能与dupilumab对免疫系统的调节作用有关。dupilumab通过抑制IL-4和IL-13的信号传导，可能间接影响CD200的表达以及IgE的产生。这种影响可能表现为免疫系统的代偿性变化，导致CD200与IgE水平之间的非线性关联。此外，CD200通过与CD200R受体相互作用，能够发送抑制性信号，从而调节免疫细胞的活动，包括B细胞和IgE的生成。因此，dupilumab的治疗可能通过改变免疫系统的整体状态，影响CD200的表达及其与IgE之间的关系。

研究结果表明，dupilumab治疗的AD患者中，特异性IgE水平在某些分子成分上有所升高，如Bla g 9（德国蟑螂过敏原）和Mala s 11（霉菌过敏原）。然而，这些变化并未达到统计学意义上的显著性，可能与样本量较小或数据的高变异系数有关。因此，研究者认为，如果样本量更大，可能会发现更显著的关联性。此外，dupilumab治疗的AD患者中，针对某些过敏原分子成分的特异性IgE水平始终高于未接受治疗的患者，这可能与治疗对免疫系统的影响有关，但具体机制仍需进一步研究。

除了CD200，本研究团队此前还探讨了B细胞表面CD23的表达与IgE水平之间的关系。研究发现，CD23的表达与针对尘螨分子成分的特异性IgE水平之间存在较强的相关性，最高可达49%。这一发现表明，CD23可能在调节IgE的产生中起到重要作用。CD23的表达与IgE的结合频率增加可能意味着免疫系统对某些过敏原的反应模式发生了变化，从而降低了肥大细胞和嗜碱性粒细胞的激活，减少了过敏性炎症的发生。此外，dupilumab治疗的AD患者中，CD23表达与嗜酸性粒细胞计数之间的相关性也较强，这可能表明CD23在调节免疫细胞之间的相互作用中发挥了关键作用。

尽管本研究未能证实CD200与特异性IgE水平之间存在显著的关联性，但它为理解AD的免疫机制提供了新的视角。研究结果显示，CD200可能不是调节IgE水平的主要因素，而其他免疫调控途径可能在这一过程中扮演更重要的角色。例如，CD23的表达与IgE水平之间的关系表明，B细胞表面的其他分子可能在过敏反应的调控中起到更关键的作用。此外，研究还提到，CD200信号可能在免疫耐受中发挥重要作用，这种作用可能超越传统的T辅助细胞（T_H2）通路抑制，为AD的治疗提供了新的思路。

在讨论部分，研究者进一步探讨了CD200在免疫系统中的作用。CD200与CD200R的相互作用被认为能够抑制多种促炎性分子的表达，包括肿瘤坏死因子、干扰素和诱导型一氧化氮合酶等。这种抑制作用可能有助于维持免疫系统的平衡，防止过度的炎症反应。此外，一些病原体（如寄生虫、细菌和病毒）可能利用CD200-CD200R通路来削弱宿主的免疫防御，这提示CD200在免疫调节中的重要性。然而，这种复杂的调控机制在AD中的具体作用仍需深入研究。

IgE在过敏反应中扮演核心角色，其水平与过敏原的敏感性密切相关。尽管阻断IgE的产生可以有效减轻过敏症状，但现有的治疗方法如IL-4Rα阻断剂只能缓慢降低IgE水平。这可能与长期存活的IgE产生浆细胞有关，这些细胞能够维持过敏记忆。一项研究发现，使用BCMAxCD3双特异性抗体可以暂时清除这些浆细胞，从而降低IgE水平。然而，IgE水平在治疗后迅速反弹，这表明仅依赖于清除浆细胞可能不足以实现长期的治疗效果。因此，研究者提出了一种联合治疗策略，即结合IL-4Rα阻断剂和BCMAxCD3抗体，以同时抑制IgE的产生和清除其产生细胞，从而防止IgE水平的回升。这种策略在小鼠模型中成功预防了过敏反应，并可能为人类提供更持久的过敏治疗方案。

在本研究中，dupilumab治疗的AD患者中，针对Bla g 9的特异性IgE水平显著高于未接受治疗的患者，而针对Mala s 11的IgE水平则接近统计学显著性。这一发现可能提示dupilumab在某些过敏原的敏感性方面具有特定的影响。然而，由于样本量较小以及数据的高变异系数，这些变化未能达到显著水平。因此，研究者建议未来的研究可以扩大样本量，以更准确地评估dupilumab对IgE水平的影响。

此外，研究还指出，AD与淋巴瘤之间的潜在联系。多项研究显示，AD患者，尤其是严重AD患者，可能面临更高的淋巴瘤风险，包括霍奇金淋巴瘤（HL）、非霍奇金淋巴瘤（NHL）和T细胞淋巴瘤（TCL）。CD200的表达可能与这种风险相关，其在免疫系统中的调节作用可能影响淋巴瘤的发生和发展。因此，理解CD200在AD中的作用不仅有助于疾病的治疗，还可能为相关并发症的预防提供新的思路。

总的来说，本研究揭示了CD200在B细胞上的表达与AD患者中特异性IgE水平之间的复杂关系。尽管在未接受dupilumab治疗的患者中，CD200与IgE之间的关联性较低，但在接受治疗的患者中，这种关系呈现出非线性特征。这一发现可能与dupilumab对免疫系统的调节作用有关，提示CD200可能在AD的免疫调控中发挥一定的作用，但并非主导因素。此外，研究还强调了其他免疫调控途径的重要性，如CD23的表达与IgE水平之间的关系，以及dupilumab对嗜酸性粒细胞和CD203+肥大细胞的影响。这些发现不仅有助于理解AD的免疫机制，还可能为未来的治疗策略提供新的方向。

研究团队还对本研究的局限性进行了讨论。由于样本量较小，某些潜在的关联性可能未能达到统计学显著性。此外，数据的高变异系数可能影响结果的可靠性。因此，未来的研究需要更大的样本量和更精确的测量方法，以进一步验证CD200与IgE水平之间的关系。同时，研究还提到，CD200在免疫系统中的作用可能涉及多种机制，包括对免疫细胞的直接调节以及对其他免疫因子的间接影响。因此，未来的研究应进一步探讨CD200在不同免疫环境中的具体作用，以全面理解其在AD中的潜在价值。

在结论部分，研究者指出，尽管本研究未能证实CD200与特异性IgE水平之间存在显著的关联性，但该研究仍为AD的免疫机制提供了新的见解。CD200可能不是调节IgE水平的主要因素，而其他免疫调控途径可能在这一过程中起到更重要的作用。因此，未来的研究应进一步探索这些潜在的免疫调控机制，以更全面地理解AD的免疫环境，并为更有效的治疗策略提供科学依据。

最后，研究团队对本研究的资助和支持表示感谢。研究过程中，Ms. Mgr. Je?ková Libu?e和Ms. Mgr. ?álková Yvona在技术方面的支持至关重要。此外，研究者还声明没有潜在的利益冲突，确保了研究结果的客观性和可靠性。这一研究为AD的免疫机制和治疗策略提供了重要的参考，也为未来的研究方向奠定了基础。