评估3D打印骨骼模型作为兽医解剖学教学工具的有效性：来自学生和教师的见解

《The Veterinary Journal》：Evaluating the Effectiveness of 3D-Printed Bone Models as Educational Tools in Veterinary Anatomy: Insights from Students and Teachers

猪链球菌病感染猪治疗后唾液生物标志物变化及检测方法验证。采用Alpha-LISA技术开发CRP和Hp唾液检测新方法，评估CRP、Hp、ADA、Calprotectin、TP和sAA在治疗前后变化。结果显示，康复组猪在治疗3天后CRP和sAA显著下降（p<0.05，p<0.01），7天后所有标志物均下降，证实唾液可用于治疗监测，其中CRP和sAA为早期预测指标。

　　这项研究主要关注了在猪群中感染溶血性链球菌（Streptococcus suis, S. suis）后，通过唾液样本中一系列生物标志物的变化来评估治疗效果。研究中的生物标志物包括C反应蛋白（CRP）、血红蛋白结合蛋白（Hp）、腺苷脱氨酶（ADA）、钙保护素（Calprotectin，即S100A8/A9）以及总蛋白（TP）和唾液α-淀粉酶（sAA）。这些生物标志物不仅在炎症反应中扮演重要角色，还与免疫系统活动和压力反应密切相关，为疾病监测和治疗评估提供了新的可能性。

首先，S. suis是一种常见的猪病原体，能够引发严重的疾病如脑膜炎、关节炎和肺炎，对养猪业造成显著的经济损失。此外，它也是一种人畜共患病，对人类健康构成潜在威胁。因此，寻找新的监测方法和策略对于控制和管理该病的爆发、减少抗生素使用以及减轻对动物和人类健康的负面影响至关重要。唾液作为一种非侵入性、易于获取的生物样本，近年来在兽医领域的应用逐渐增多。它的采集过程不需要专业人员，也不对动物造成较大应激，适合在农场环境中进行重复采样，这对于高度敏感于应激的猪来说是一个重要的优势。

CRP和Hp属于急性期蛋白（APPs），是机体对炎症反应的重要指标。在健康状态下，这些蛋白的浓度较低，但在炎症或感染发生后会迅速上升。CRP通常被认为是正向APP，其浓度在炎症刺激后会迅速增加，随后快速下降。而Hp则属于中度正向APP，其浓度变化相对缓慢。本研究中，采用了一种基于Alpha-LISA技术的新方法，用于测量唾液中的CRP和Hp。该方法具有高灵敏度、低样本体积需求以及无需洗涤步骤等优点，从而提高了实验效率。通过优化实验条件，如抗体浓度、受体和供体微球的使用量，确保了实验的精确性和准确性。实验结果显示，CRP和Hp的检测方法在不同浓度下均表现出良好的线性关系和恢复率，满足临床需求。

除了APPs之外，研究还关注了其他与免疫系统相关的生物标志物，如ADA、Calprotectin和TP。这些标志物在感染后的唾液中也表现出浓度变化。ADA是一种与免疫细胞分化和成熟相关的酶，其活性在感染后通常会升高。Calprotectin是一种具有多种促炎功能的异源二聚体蛋白，能够调节白细胞的粘附、迁移和吞噬作用。TP则反映唾液中总蛋白含量，可能与免疫球蛋白和急性期蛋白的生成有关。sAA作为一种与压力反应相关的生物标志物，其活性在感染期间会增加，可能与疾病引起的不适和疼痛有关。

研究中选取了28只7-8周龄、体重12-15公斤的猪崽，这些猪崽来自西班牙南部的一家商业猪场。在研究过程中，这些猪崽根据临床症状被分为不同严重程度的组别，其中严重程度为1的猪崽被归为恢复组（Group A），而严重程度为2到4的猪崽被归为未恢复组（Group B）。通过在治疗前（D0）、治疗后三天（D3）和治疗后一周（D7）采集唾液样本，研究者对这些生物标志物的浓度变化进行了分析。结果显示，在治疗后一周，恢复组中所有生物标志物的浓度均显著低于未恢复组。而在治疗后三天，CRP和sAA的浓度已经显著下降，表明它们可能是早期治疗有效的指标。

此外，研究还通过统计分析评估了这些生物标志物之间的相关性。结果显示，CRP与Hp之间存在高度正相关，而CRP与Calprotectin、TP之间也存在中度正相关。这表明这些标志物可能在相同的生理和病理过程中发挥作用。同时，sAA与CRP和Hp之间也表现出一定的相关性，进一步支持了它们在评估治疗效果中的潜在价值。

研究中还提到，尽管这些生物标志物的变化可能与S. suis感染有关，但它们也可能受到其他炎症条件或应激因素的影响。因此，在解释这些标志物的浓度变化时，需要综合考虑其他可能的混杂因素，如共感染或环境应激。此外，研究还指出，由于样本数量相对较少，未来的研究应扩大样本规模，并考虑设立未感染的对照组，以更准确地评估这些标志物在疾病诊断和治疗监测中的作用。

总体而言，本研究验证了基于Alpha-LISA技术的唾液中CRP和Hp检测方法的可行性和有效性，并展示了这些生物标志物在评估S. suis感染治疗效果方面的潜力。研究结果表明，唾液可以作为一种有效的生物样本，用于监测感染治疗的效果，特别是在治疗后一周，所有生物标志物的浓度显著下降，反映了治疗的有效性。其中，CRP和sAA由于其在治疗后三天的快速下降，可能作为早期治疗成功的生物标志物。未来的研究应进一步探索这些标志物的阈值范围，并在更大规模的动物群体中验证其临床应用价值。