一种新型三特异性单链抗体的抗肿瘤活性：该抗体靶向hERG1/β1整合素复合体和TRAIL受体 开放获取

《Molecular Cancer Therapeutics》：Antineoplastic Activity of a Novel Trispecific Single-Chain Antibody Targeting the hERG1/β1 Integrin Complex and TRAIL Receptors Open Access

靶向抗体scDb-hERG1-β1-TRAIL通过靶向hERG1/β1整合素复合物并激活TRAIL受体，显著抑制三阴性乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡，动物实验显示其有效抑制皮下和原位移植瘤生长，且半衰期达25小时，安全性良好。

　　近年来，癌症治疗领域取得了显著进展，靶向治疗和免疫治疗成为主流策略之一。TRAIL（TNF-related apoptosis-inducing ligand，肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体）作为一种天然的细胞凋亡诱导分子，因其能够特异性地激活细胞凋亡通路，成为癌症治疗的重要研究对象。然而，TRAIL在临床应用中仍面临诸多挑战，如其在体内的半衰期较短、对DR5受体的活性较低以及可能引发的全身毒性。为了解决这些问题，研究人员开始探索将TRAIL与其他靶向分子结合的策略，以提高其在肿瘤治疗中的效率和特异性。

本文介绍了一种新型的抗体药物结合物，即scDb-hERG1-β1-TRAIL，这是一种由单链二聚体（scDb）靶向hERG1/β1整合素复合物和三个TRAIL序列组成的“三特异性”抗体。hERG1（人类钾离子通道）和β1整合素是多种癌症细胞中特异性表达的靶点，而TRAIL则能通过结合DR4和DR5受体诱导细胞凋亡。这种新型抗体结合了靶向特异性（scDb-hERG1-β1）和凋亡诱导能力（TRAIL），使其能够更有效地作用于肿瘤细胞，同时减少对正常细胞的损伤。

在体外实验中，该抗体对乳腺癌细胞（尤其是三阴性乳腺癌细胞）表现出显著的抗增殖和促凋亡作用。实验显示，scDb-hERG1-β1-TRAIL能够减少肿瘤细胞的存活率，促进细胞凋亡，并在多种细胞系中表现出较高的特异性。通过细胞活性检测、凋亡分析以及细胞增殖实验，研究人员发现该抗体对TRAIL敏感的细胞（如MDA-MB-231）作用尤为明显，而在TRAIL耐药的细胞（如MCF-7）中效果较弱。此外，该抗体在3D微流控芯片系统中表现出良好的细胞毒性，能够有效诱导肿瘤细胞死亡，并通过光声成像（PAI）和超声成像（US）评估其在肿瘤组织中的分布和作用效果。

在体内实验中，研究人员使用了两种乳腺癌小鼠模型：皮下移植模型和原位移植模型。结果显示，scDb-hERG1-β1-TRAIL能够显著减少肿瘤体积，并在皮下模型中表现出更长的半衰期（25小时），这有助于其在体内的稳定性和持续作用。此外，该抗体在体内具有良好的生物分布特性，能够在肿瘤组织中有效富集，同时对心脏、肝脏和肾脏等正常组织无明显毒性。这些结果表明，scDb-hERG1-β1-TRAIL在体内的安全性较高，且具有良好的抗肿瘤活性。

为了进一步验证其疗效，研究人员还进行了组织病理学分析，使用免疫组化（IHC）和TUNEL凋亡检测方法，评估了该抗体对肿瘤组织的影响。结果显示，scDb-hERG1-β1-TRAIL能够显著减少肿瘤细胞的存活，并诱导大量细胞凋亡。同时，该抗体在肿瘤组织中还表现出较高的缺氧体积和更大的坏死区域，这表明其能够有效破坏肿瘤组织，甚至在较小的肿瘤中也能引发严重的组织损伤。

此外，该抗体的开发还涉及一系列复杂的分子生物学和生物工程技术。例如，研究人员通过PCR和基因重组技术，将TRAIL序列与scDb-hERG1-β1结合，构建了新型抗体。该抗体在表达载体中进行表达和纯化，通过亲和层析和超滤等方法进行分离和浓缩。最终，通过质谱分析和Western blot等实验，确认了其分子量和结构的正确性。

本文的研究成果表明，scDb-hERG1-β1-TRAIL作为一种新型的抗体药物结合物，具有良好的靶向性和促凋亡活性，能够有效抑制肿瘤生长，并且在体内表现出较低的毒副作用。这一发现为三阴性乳腺癌等难治性癌症的治疗提供了新的思路。未来，该抗体有望在临床试验中进一步验证其安全性和有效性，为癌症患者提供更有效的治疗选择。