大脑石蜡切片中小胶质细胞的免疫表型分析

《Cell and Tissue Biology》：Microglia Immunophenotyping in Paraffin Sections of the Brain

微胶质表型鉴定研究采用Wistar和SHR大鼠脑组织（n=8），通过Iba-1、CD68和vimentin标记进行双免疫荧光比较分析。结果显示静息微胶质细胞无CD68和vimentin表达，而吞噬病原体和细胞碎屑活跃区呈现Iba-1+/CD68+表型，侧脑室和第三脑室室管膜区存在Iba-1+/vimentin+亚型，形态学证实激活态微胶质呈现M2a极化特征。

　　

摘要

目的：在神经炎症过程中，小胶质细胞会获得特定的结构和功能特征，这使得其检测和分析变得复杂。此外，现有的任何一种小胶质细胞标记物都无法单独提供关于这些细胞功能免疫状态的全面信息。本研究的目的是探讨利用多种功能标记物（Iba-1、CD68和vimentin）来表征小胶质细胞免疫表型的可能性。材料与方法：研究对象为Wistar大鼠和SHR大鼠的脑组织（n = 8）。在比较免疫组化研究中，使用Iba-1、P2Y12和vimentin作为小胶质细胞的标记蛋白。结果与讨论：研究结果显示，典型的静息状态下的小胶质细胞不表达CD68和vimentin，表明它们没有进行活跃的吞噬作用。而在那些需要清除病原体和细胞碎片的脑区，小胶质细胞呈现Iba-1⁺/CD68⁺的表型。Iba-1和vimentin的同时表达是侧脑室和第三脑室室管膜下及室管膜上细胞的典型特征。根据对Iba-1⁺/CD68⁺和Iba-1⁺/vimentin⁺小胶质细胞的形态和定位分析，可以推测第三脑室底部的部分细胞同时具有这三种标记物的表达。激活后的Iba-1⁺/CD68⁺和Iba-1⁺/vimentin⁺小胶质细胞属于M2a极化类型，这一结论不仅基于蛋白质标记物的表达，还通过其细胞形态（而非变形虫样形态）得到证实。结论：利用共聚焦激光扫描显微镜技术，双标记物Iba-1/CD68和Iba-1/vimentin的免疫荧光方法能够高效地表征大鼠脑中的多种小胶质细胞和巨噬细胞表型。通过结合不同功能标记物的双免疫荧光分析与形态学观察，可以评估特定小胶质细胞表型的活性及其潜在功能。