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T 细胞淋巴瘤治疗面临难题，缺乏独特标记区分健康与恶性 T 细胞。研究人员分析 12 例 T 细胞淋巴瘤病例的 T 细胞受体单细胞测序数据，发现 TRBC 寡克隆性，挑战了 TRBC 表达的二元假设，为治疗策略调整提供依据。
在肿瘤治疗的战场上，T 细胞淋巴瘤一直是个棘手的 “敌人”。治疗 T 细胞淋巴瘤时，面临的一大难题是缺乏能够精准区分健康 T 细胞和恶性 T 细胞的独特标记。这一困境使得治疗过程中容易出现危及生命的 T 细胞耗竭，以及 CAR-T 细胞之间的 “自相残杀” 现象，严重影响治疗效果。
目前，针对 T 细胞淋巴瘤的免疫治疗研究中，以 T 细胞受体 β 链恒定域 2（TRBC2）为靶点的免疫疗法备受关注。此前已有研究展示了针对 TRBC2 的免疫疗法的精准设计，同时 TRBC1 特异性 CAR-T 细胞疗法也已进入临床试验阶段。然而，令人遗憾的是，部分患者在接受治疗后出现了早期疾病进展的情况，这意味着仅仅依靠有限的 CAR-T 细胞扩增和持续存在，可能无法充分解释肿瘤控制不佳的现象，背后或许存在原发性耐药机制，亟待深入探索。
为了揭开这一谜团，来自瑞士巴塞尔大学和巴塞尔大学医院转化免疫肿瘤学系、德国弗莱堡智能肿瘤学合作研究所等机构的研究人员，开展了一项极具意义的研究。他们对 12 例不同的 T 细胞淋巴瘤病例中 CD3+分选的 T 细胞进行 T 细胞受体单细胞测序数据的分析，旨在探究 TRBC 的表达情况。
研究结果意义重大，他们发现了 TRBC 的寡克隆性。在 12 例未选择的病例中，四分之一的病例符合 TRBC1 或 TRBC2 表达的二分法模式，即主要肿瘤克隆及其亚克隆仅表达其中一条链；7 例病例中，异质性的 TRA/TRB 配对导致部分恶性细胞表达与主要淋巴瘤克隆不同的 TRBC 链；还有 2 例病例中，主要恶性克隆完全缺乏 TRBC 表达。这一发现挑战了此前关于外周 T 细胞淋巴瘤 TRBC1 或 TRBC2 表达的二元假设，该假设是 TRBC 导向疗法的基础，但现有临床试验中的筛选方法可能无法检测到亚克隆 TRBC 的异质性。此外，研究结果还与先前的一些研究相契合，表明 TRBC1 和 TRBC2 使用的克隆异质性以及 T 细胞受体表达的缺失，都可能是患者接受 TRBC1 或 TRBC2 导向的 CAR-T 细胞疗法时原发性治疗失败的潜在机制。这一研究为后续治疗策略的调整提供了关键依据，有助于推动 T 细胞淋巴瘤治疗的发展。
该研究主要采用了以下关键技术方法：首先是单细胞 TCR 测序技术，研究人员使用 Next GEM Single Cell 5’ Kit v2 和 Chromium Single Cell Human TCR Amplification kits，对冷冻保存的外周血单个核细胞（PBMCs）中 FACS 分选的 CD3 T 细胞进行单细胞 TCR 测序，同时还获取了其他研究团队公开的相关单细胞 TCR 测序数据。其次是数据处理与分析技术，利用 Cell Ranger V (D) J pipeline 对测序数据进行处理，将其与 vdj - GRCh38 参考基因组进行比对，仅采用有生产性的重排进行下游分析，通过设定 TRA 或 TRB CDR3 构成克隆空间 > 5% 为克隆型等标准，定义恶性细胞并分析其 TRBC1 或 TRBC2 表达情况 。
研究结果
- TRBC 的寡克隆性分析：通过对 12 例不同类型的外周 T 细胞淋巴瘤病例进行单细胞 TCR 测序数据的分析，发现部分病例存在 TRBC1 或 TRBC2 单一表达的情况，部分病例存在恶性细胞表达不同 TRBC 链的异质性，还有部分病例主要恶性克隆完全缺乏 TRBC 表达，揭示了 TRBC 的寡克隆性。
- 对现有理论和疗法的挑战：研究结果挑战了之前认为外周 T 细胞淋巴瘤 TRBC1 或 TRBC2 表达呈二元模式的假设，这一假设是当前 TRBC 导向疗法的重要基础，说明现有临床试验的筛选方法可能无法检测到亚克隆 TRBC 的异质性，影响治疗效果评估。
- 与其他研究的一致性：研究结果与先前如 Liu 等人关于原发性皮肤 T 细胞淋巴瘤中 T 细胞受体表达缺失的研究，以及近期使用特异性 TRBC1 和 TRBC2 导向抗体的流式细胞术研究结果相符，进一步验证了 TRBC 克隆异质性和 T 细胞受体表达缺失在 T 细胞淋巴瘤治疗中的重要性。
研究结论和讨论
研究人员通过对 12 例 T 细胞淋巴瘤病例的深入研究，发现了 TRBC 的寡克隆性，这一发现挑战了传统的 TRBC 表达二元假设，为 T 细胞淋巴瘤的治疗提供了新的思考方向。TRBC1 和 TRBC2 使用的克隆异质性以及 T 细胞受体表达的缺失，极有可能是 CAR-T 细胞疗法原发性治疗失败的潜在机制。这不仅有助于理解 T 细胞淋巴瘤的发病机制，更为未来优化治疗策略、提高治疗效果提供了关键线索。
然而，该研究也存在一定的局限性，如恶性克隆的定义存在主观性，RNA/DNA 质量可能影响 TCR 测序准确性，且目前无法准确估计不同或缺失 TRBC 表达的比例。但这并不影响其重要意义，后续研究可以在此基础上进一步深入探索，结合更多数据和技术，更全面地剖析 T 细胞淋巴瘤的发病机制和治疗靶点，推动 T 细胞淋巴瘤免疫治疗领域的发展，为攻克这一难治性疾病带来新的希望。此次研究成果发表在《Nature Communications》，为该领域的研究提供了重要的参考依据，吸引更多科研人员投入到相关研究中，共同探索 T 细胞淋巴瘤治疗的新突破。
