高分辨率原位捕获真核生物核糖体动态：解锁细胞内蛋白功能密码

许多蛋白质复合物在细胞中高度动态，为解析其功能，研究人员利用冷冻电镜，对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）细胞薄片中的核糖体进行研究。获得 451,700 个核糖体颗粒，解析出 60S 区域 2.9? 分辨率结构，鉴定出 20 多种构象，重建翻译延伸循环，意义重大。

　　许多蛋白质复合物在细胞中处于高度动态变化状态，因此，表征它们在细胞内的构象变化对于揭示其功能至关重要。在本研究中，研究人员运用冷冻电镜（cryo - electron microscopy）技术，从酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）细胞薄片中获取了 451,700 个核糖体颗粒，并通过原位单颗粒分析，将 60S 区域的分辨率解析至 2.9?。通过三维分类，鉴定出 20 多种不同的构象，其分辨率通常高于 4?。这些构象被用于重建真核生物翻译过程中带有延伸因子（eEFs）的完整延伸循环。研究发现，紧密型的 eEF2 在亚基滚动后锚定在部分旋转的核糖体上，研究人员推测它能稳定局部构象以促进肽基转移。此外，还观察到开放型 eEF3 与完全旋转的核糖体结合，其构象变化与 40S 亚基的头部转动和主体反向旋转相耦合。