精准修饰长链 RNA：工程化 DNA 聚合酶开辟新径

在基础研究和治疗应用中，精准修饰特定位置的大 RNA 合成需求迫切但方法有限。研究人员通过半理性设计工程化 DNA 聚合酶变体，能在 RNA 特定位置高效引入多种修饰，相关 mRNA 产物可增强稳定性、影响蛋白生产，为 RNA 功能化提供新工具。

　　在基础研究和治疗应用中，对特定位置具有精确修饰的大型 RNA（核糖核酸）的合成需求极高，然而高效的合成方法却十分有限。最近，经过工程改造的 DNA（脱氧核糖核酸）聚合酶成为了颇具吸引力的 RNA 标记工具，与传统的 RNA 聚合酶相比具有明显优势。在这里，研究人员通过半理性设计，构建出一种 DNA 聚合酶变体，并利用它将多种修饰，包括碱基修饰、2'^O- 核糖修饰和主链修饰，精确地整合到 RNA 内的目标位置。在大多数修饰案例中，修饰效率超过 85%，成功地将 2'^O- 甲基、硫代磷酸酯、N₄- 乙酰胞苷和荧光团引入到增强型绿色荧光蛋白（eGFP）和萤火虫荧光素酶信使 RNA（mRNA）的特定位点。含有 N₄- 乙酰胞苷、2'^O- 甲基和 / 或硫代磷酸酯的 mRNA 产物，展现出了增强稳定性和影响蛋白质生产的能力。这种方法为 RNA 的全面功能化提供了一种很有前景的工具，使得无论 RNA 的长度和序列如何，都能引入大量修饰。