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卵巢癌（OC）死亡率高，早期诊断困难。研究人员开展 piRNAs 在 OC 中作用及机制的研究。发现 piR - 26441 在 OC 中低表达，可通过 YTHDC1/TSFM 信号轴抑制线粒体氧化磷酸化（OXPHOS）和肿瘤发生，为 OC 治疗提供潜在靶点。
在女性恶性肿瘤的 “战场” 上，卵巢癌（OC）可谓是一颗 “毒瘤”。它是全球女性中死亡率最高的常见恶性癌症之一，2020 年全球约有 313,959 例新发病例，207,252 人因它失去生命。当前，卵巢癌的治疗主要依靠手术和铂类药物及紫杉烷化疗，但由于早期症状隐匿、缺乏有效早期检测生物标志物，患者生存率依旧不容乐观。因此，探寻卵巢癌发生和进展的分子机制，成为了医学领域亟待攻克的难题。
广州医科大学附属第三医院的研究人员勇挑重担，开展了关于 Piwi 相互作用 RNA（piRNAs）在卵巢癌中作用及机制的研究。他们发现 piR - 26441 这一关键分子，它在卵巢癌中异常下调，过表达 piR - 26441 可抑制卵巢癌细胞的恶性特征和肿瘤生长，为卵巢癌的治疗带来了新的曙光。该研究成果发表在《Cell Death and Disease》杂志上。
研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。他们收集了 80 例卵巢癌组织和 18 例正常卵巢组织样本。通过小 RNA 测序（sRNA - Seq）筛选差异表达的 piRNAs；利用定量实时逆转录 PCR（qRT - PCR）检测基因表达水平；采用 RNA 结合蛋白免疫沉淀（RIP）和甲基化 RIP（meRIP）测序探究分子间相互作用和 m6A 修饰情况；借助细胞活力、迁移、凋亡等实验评估细胞生物学行为；构建裸鼠异种移植模型和患者来源的类器官（PDOs）模型研究体内肿瘤生长情况 。
研究结果如下：
- piR - 26441 在 OC 中显著下调：通过 sRNA - Seq 分析四对卵巢癌和正常卵巢组织，发现 piR - 26441 在卵巢癌中表达下调，且其表达与 OC 分期相关，FIGO III - IV 期疾病中表达更低。在不同卵巢癌细胞系中，piR - 26441 表达存在差异，在 OVCAR3 细胞中表达最低，在 CAOV3 细胞中表达最高。
- piR - 26441 过表达抑制 OC 细胞恶性生物学行为：在 CAOV3 和 OVCAR3 细胞中干扰 piR - 26441 表达，CCK - 8 实验表明过表达 piR - 26441 可降低细胞增殖率，促进细胞凋亡，划痕实验显示其能减弱细胞迁移能力。
- YTHDC1 是 piR - 26441 在 OC 细胞中的靶标：RNA pulldown 实验结合质谱（MS）分析，确定 YTHDC1 是与 piR - 26441 特异性结合的关键基因。进一步通过 RNA pulldown、RIP、FISH 等实验证实 piR - 26441 与 YTHDC1 相互作用且在细胞核共定位。
- piR - 26441 增加 YTHDC1 蛋白水平的机制：piR - 26441 过表达增加 YTHDC1 蛋白水平但不影响其 mRNA 水平，敲低则相反。研究发现 piR - 26441 通过减少 TRIM56 介导的 YTHDC1 泛素化，调节 YTHDC1 蛋白稳定性。
- TSFM 是 piR - 26441 - YTHDC1 级联的效应器：m6A 测序（m6A - Seq）发现 piR - 26441 过表达使 TSFM 的 mRNA 水平降低、m6A 峰增加。qRT - PCR、RIP 等实验表明 piR - 26441 通过 YTHDC1 降低 TSFM mRNA 稳定性，下调其蛋白表达。
- piR - 26441 抑制 OC 细胞 OXPHOS 并激活 ROS 引发凋亡：因 TSFM 缺乏会降低 OXPHOS 复合物 I 和 IV 水平，研究推测 piR - 26441 可能影响线粒体功能。实验证实，piR - 26441 过表达下调 NDUFB8 表达，降低线粒体膜电位和氧消耗率，增加细胞内活性氧（ROS）水平，导致 DNA 损伤和细胞凋亡。且 piR - 26441 与线粒体呼吸链抑制剂二甲双胍具有协同作用。
- piR - 26441 通过 YTHDC1/TSFM 信号轴抑制 OC 细胞生长：在 CAOV3 细胞中，敲低 YTHDC1 或过表达 TSFM 可消除 piR - 26441 过表达对细胞生长、凋亡、ROS 水平和 DNA 损伤的影响，表明 piR - 26441 通过该信号轴抑制 OC 细胞生长。
- piR - 26441 过表达抑制 OC 体内生长和 PDOs 生长：裸鼠异种移植模型中，注射 ago - piR - 26441 的小鼠肿瘤形成慢、体积小；OC 类器官模型中，ago - piR - 26441 处理后类器官直径变小，氧消耗率降低，说明 piR - 26441 过表达抑制 OC 生长。
研究结论和讨论部分指出，卵巢癌代谢具有异质性，OXPHOS 是其重要代谢途径之一。piR - 26441 通过与 YTHDC1 相互作用，促进 TSFM 的 m6A 修饰，使其 mRNA 不稳定，降低蛋白水平，抑制线粒体呼吸，激活 ROS，引发 DNA 损伤和细胞凋亡，从而抑制卵巢癌发展。此外，piR - 26441 不仅影响线粒体 OXPHOS，还影响糖酵解和三羧酸循环（TCA），为理解肿瘤细胞代谢重塑提供了新视角。piR - 26441 作为天然肿瘤抑制因子，与线粒体呼吸链抑制剂联合使用，可能更有效地破坏卵巢癌细胞代谢功能。虽然目前距离临床应用还有很长的路要走，但该研究为卵巢癌的治疗提供了潜在的新靶点和策略，意义重大 。
