编辑推荐：
为解决 CAR-NK 疗法中 CAR 基因随机插入及表达不灵活影响疗效和安全的问题，研究人员开展将 CAR 序列整合到 NK-92MI 细胞 GAPDH 3’UTR 位点的研究。结果显示 CRISPR-CAR-NK 细胞抗肿瘤活性更强，为癌症免疫治疗提供新策略。
嵌合抗原受体修饰的自然杀伤细胞（CAR-NK）疗法正逐渐成为治疗实体瘤的一种极具前景的方法。然而，常规制备方法导致的 CAR 基因随机插入和 CAR 表达缺乏灵活性，严重影响了其疗效和安全性。在本研究中，研究人员成功建立了一种新型 CAR-NK 细胞，通过将 CAR 序列整合到 NK-92MI 细胞的 GAPDH 3’非翻译区（UTR）位点（CRISPR-CAR-NK），实现了 CAR 基因的定点整合，并让内源性调控元件来控制 CAR 的表达。
与慢病毒转导的 CAR-NK 细胞相比，CRISPR-CAR-NK 细胞具有相当的生长能力，但其抗肿瘤活性更为出色。当与肿瘤细胞共培养时，CRISPR-CAR-NK 细胞能更有效地激活和脱颗粒，这得益于其激活受体表达增加、抑制性分子表达减少。同时，它还能增强颗粒酶 B（Granzyme B）和干扰素 -γ（IFN-γ）的产生，更有效地触发 IFN-γ 信号通路。
此外，在代谢特征和信号依赖性方面，CRISPR-CAR-NK 细胞与传统 CAR-NK 细胞存在显著差异。值得注意的是，CRISPR-CAR-NK 细胞代谢水平较低，但这并不影响其抗肿瘤活性，并且其功能对磷脂酰肌醇 3 - 激酶 - 蛋白激酶 B（PI3K-AKT）通路的依赖程度较低。这意味着 CRISPR-CAR-NK 细胞在与 AKT 抑制剂联合使用时具有显著的协同增效潜力，同时也能更好地适应肿瘤微环境中的营养压力。这些研究结果为癌症免疫治疗提供了一种新的潜在策略，也为利用 CRISPR 技术优化 CAR-NK 细胞提供了实验基础和范例，凸显了 CRISPR 技术在推进免疫治疗领域的巨大潜力。
