通过VICTOR Nivo上的AlphaLISA模块加快您的免疫检测速度

Alpha检测技术

Alpha（放大的发光邻近均相检测）是一种基于微珠标记的均相发光检测技术，能够作用于多种目标分子。我们从检测原理上对AlphaLISA和ELISA进行对比（图1）：AlphaLISA实验中通过680nm的激发光来激发供体微珠，此时供体微珠产生的单体氧扩散到受体微珠上，受体微珠与单体氧产生一系列的级联反应发射出615nm的发射光，此时使用VICTOR Nivo中的Alpha模块进行检测即可；ELISA实验需要经过封闭、清洗等一系列步骤来去除非特异性结合抗体。传统ELISA检测技术的工作流程中需要很多清洗的步骤，既费时又费力，AlphaLISA检测简化了许多的工作流程并且加快了检测的速度。

图1：A）AlphaLISA技术原理；B）ELISA技术原理。

AlphaLISA与ELISA技术参数对比

使用Revvity提供的The AlphaLISA Mouse Tumor Necrosis Factor alpha (mTNF-α) Kit (#AL505 C/F)和ELISA mTNF-α Kit进行检测，AlphaLISA和ELISA分别使用VICTOR Nivo的Alpha和Abs检测模块（表1），其中Alpha检测模块中使用独立的Alpha激光模块，以最适的能量强度去激发供体微珠，拥有较高的信噪比。

表1：VICTOR Nivo用于进行AlphaLISA和ELISA检测模块的参数。

根据数据结果来看，这两种检测方法的表现有所差异（表2）。表2中显示两种方法的检测下限几乎相同，EC50参数略有差异，但仍在可接受范围内。ELISA法的检测浓度范围有2个数量级，而AlphaLISA法的检测浓度范围有着3-4个数量级。由于AlphaLISA的检测范围更宽，因此不需要根据检测试剂盒的检测范围进行太多调整，使得检测试剂盒的开发变得更加简单。

表2：AlphaLISA法和ELISA法检测结果比较。

AlphaLISA是一种均相检测模式，与ELISA法相比，AlphaLISA无需任何清洗的步骤，同时也减少了许多移液的步骤。AlphaLISA和ELISA的mouseTNF-α检测方案对比表如下（表3），AlphaLISA mouseTNF-α检测可在2.5-3小时内完成且无需清洗，而ELISA mouseTNF-α检测则需5-6小时内完成且需要进行8次清洗。

表3：AlphaLISA与ELISA检测方案对比表。

随着Alpha技术的加入，VICTOR Nivo多模式读板仪可以更好地满足实验室日常生化及细胞检测。通过以上对比的数据我们可以看出，AlphaLISA技术拥有更快、更简单的工作流程，总体实验时间缩短了约50%，灵敏度略有提高，无需清洗步骤也提高了检测的稳定性和重复性。

Revvity拥有30多年的仪器研发经验，同时也在不间断地进行试剂研发，能够为用户的实验提供一整套的解决方案。VICTOR Nivo凭借其易于使用的软件和可实现远程访问的设备，成为多用户实验室的理想选择。

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