NEB@了你 | 快来看ta如何玩转DNA组装与无缝克隆！

「无缝克隆」是一种新型克隆解决方案，它突破了很多现有克隆方法的局限，可在质粒的任何位点进行一个或多个目的DNA片段的插入，此过程没有序列依赖性且可实现无缝组装。

无缝克隆可有序组装多个片段，组装不受序列限制且不引入额外序列，这为合成生物学工作提供了强大的技术支撑，如克隆整个代谢操控子或全基因组重建。

NEBuilder®高保真DNA组装和NEBridge®Golden Gate组装引领着下一代克隆技术。两种克隆方法都兼具高效率 (>95%) 和准确性，确保您可以快速且准确地完成克隆构建。

今天让我们再次回顾下明星产品之一：

NEBuilder® HiFi DNA Assembly

（NEBuilder® 高保真 DNA 组装）

NEBuilder®高保真DNA组装基于Gibson无缝组装原理，并在其基础上进行了优化，可实现精准的DNA片段连接。试剂盒通过使用新型高保真聚合酶来实现简单快速的无缝克隆，是合成生物学的绝佳利器。

PART 01

选择NEBuilder®的4大理由：

1. 省时：

15分钟内完成简单快速的无缝克隆。

2. 便捷：

可用于“标准长度”片段和大片段的组装，片段最多可达11个。

3. 兼容：

可直接进行下游实验，DNA直接用于转化或者作为PCR或RCA的模板。

4. 适用性强：

适用于各种DNA改造，包括定点突变。

PART 02

NEBuilder®HiFi DNA组装克隆方法：

PART 03

NEBuilder®适用于多种组装方案：

PART 04

工具：

NEBuilder®组装工具

可用于根据输入的片段序列和用于扩增的聚合酶，为您NEBuilder®HiFi DNA组装或Gibson组装®反应设计引物。

PART 05

来看实例！

NEBuilder®高保真DNA组装提高4个片段组装反应的效率：

使用NEBuilder®高保真DNA组装预混液、GeneArt®****混合液（A品牌）和In-Fusion®****组装预混液（B品牌），组装具有20bp重叠的四个片段（约20fmol），构建 pUC19载体。在50℃下进行组装反应，反应时间为60分钟或15分钟。将2μl的每种组装后的混合物转化到NEB 5-alpha E.coli感受态细胞（NEB#C2987）中，并涂布到含IPTG和X-Gal的LB/Amp平板上。统计代表正确组装的蓝色菌落数（>总菌落的95%）。

NEBuilder®高保真DNA组装预混液得到的菌落数多于两种竞品。

产品信息

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