克服免疫疗法的局限性

作为德国研究基金会(DFG) Emmy Noether项目的一部分，Karl Petri博士正在维尔茨堡大学医院(UKW)建立一个研究小组，以开发和增强新的CRISPR 2.0工具，用于生成和改进癌症靶向CAR-T细胞产品。

　　

CAR-T细胞在治疗某些血癌方面非常有效。然而，这种新疗法仍然存在挑战，该疗法于2017年首次在美国获得批准，一年后在欧洲获得批准，用于治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)。例如，目前还没有针对实体瘤的有效CAR-T细胞疗法。此外，CAR-T诱导的缓解并不总是持久的，CAR-T细胞的产生是缓慢而费力的。

维尔纽斯堡大学医院(UKW) /维尔纽斯-马克西米利安大学维尔纽斯堡大学的Karl Petri博士旨在利用一种先进的CRISPR方法来解决这些问题，以提高癌症定向免疫治疗的效率。德国研究基金会(DFG)支持他的研究项目，在接下来的六年里，在Emmy Noether计划下，提供近200万欧元的资金。

DFG艾美诺特计划的Prime-CAR检测项目

他的项目被称为Prime-CAR Inspection。“Prime”代表CRISPR 2.0方法CRISPR Prime编辑，该方法允许将DNA变化靶向和可编程地结合到治疗性T细胞中;“CAR”代表嵌合抗原受体，它使患者自身的T细胞能够识别和靶向癌细胞的特定表面分子;“检查”是指利用先进的分子诊断技术对新的基因编辑方法进行安全性验证。

“传统的CRISPR- cas9方法在DNA分子中引入了双链断裂，而CRISPR引物编辑方法只需要单链断裂，从而允许更精确的基因组修饰，”Karl Petri解释说。所有12种可能的碱基对替换，以及小的插入和删除，都可以使用CRISPR Prime编辑技术精确地整合到T细胞基因组中。

Karl Petri说:“如果CRISPR-Cas9被描述为可以选择性地敲除基因功能的DNA剪刀，那么Prime编辑就相当于可以用来精确重写DNA的橡皮擦和铅笔。”

除了优化基因编辑技术，Prime-CAR Inspection项目还旨在规范新的基因编辑技术的安全性验证，以促进临床翻译，最终为多发性骨髓瘤和其他癌症患者提供更有效的CAR-T细胞产品。

利用安全验证的CRISPR引物编辑器改善癌症靶向CAR-T细胞

“目前，CAR-T细胞疗法被批准用于某些血癌。我们的目标是扩大CAR-T细胞疗法的应用范围，提高其有效性，使实体瘤也能被CAR-T细胞有效治疗。我们还想修改CAR-T细胞，以实现更持久的缓解，”Karl Petri说。

他的研究还集中在同种异体CAR-T细胞，即来自健康供体的改良T细胞。“通过CRISPR 2.0编辑，CAR-T细胞上的某些分子可以被修改，这样免疫系统就不会排斥外来细胞。这样，大量的CAR-T细胞就可以更经济有效地生产出来。”

对于CAR-T细胞疗法，通过从患者血液中进行白细胞分离，将白细胞与其他血液成分分离。这些细胞在实验室进行基因改造，并通过10分钟的输注作为活药物重新引入患者体内。一个被激活的T细胞可以摧毁1000个肿瘤细胞。理想情况下，T细胞会终生留在体内，消灭隐藏的或新出现的肿瘤细胞。

Karl Petri在马萨诸塞州总医院和波士顿的哈佛医学院(Harvard Medical School)做了6年的研究后，于2023年夏天来到维尔茨堡大学。在J. Keith young教授和Vikram Pattanayak博士的指导下，他在美国专注于CRISPR 2.0基因编辑等新技术。

Petri博士解释说，维尔茨堡大学为实现Prime-CAR检测计划提供了独特的研究环境。Hermann Einsele教授是UKW医学诊所和第二综合诊所的主任，他开创了CAR-T细胞治疗多发性骨髓瘤的先驱，多发性骨髓瘤是仅次于白血病的第二大常见血癌。Michael Hudecek教授是细胞免疫疗法主席，他于2012年在维尔茨堡大学建立了自己的CAR-T细胞转化研究项目，并因其创新方法而多次获得认可。