在诊断林奇综合征时，IHC和NGS结果不一致该怎么办？

　　

微卫星不稳定性（MSI）可以作为遗传标志物，用于林奇综合征（Lynch syndrome）的检测和治疗。目前，IHC和PCR等传统技术是检测MSI的金标准方法，不过新一代测序（NGS）的出现带来了新的可能性。

在患者的诊断过程中，若传统技术和NGS的检测结果不一致，那该怎么办？近日，法国Gustave Roussy癌症研究中心的研究人员通过一例病例报告说明了这一问题。这份报告发表在《Frontiers in Oncology》杂志上，强调了全面分析和跨学科合作的重要性。

微卫星不稳定性反映了DNA错配修复系统出现缺陷，其中突变的积累发生在整个基因组，尤其集中在微卫星的重复区域。林奇综合征主要由错配修复基因的生殖系突变引起，包括MLH1、MSH2、MSH6、PMS2或EPCAM基因。

目前，检测MSI的金标准方法是用肿瘤组织样本开展IHC和PCR分析。不过，NGS技术的发展扩大了MSI的检测范围，特别是使用循环游离DNA（cfDNA）。因此，人们特别关注传统技术和NGS工具在MSI检测中的一致性。然而，也许会出现不一致的结果，给治疗决策带来挑战。

这项研究报告了一例26岁的男性林奇综合征和结肠癌患者，携带BRAF V600E突变。在对原发性肿瘤样本进行分析时，IHC评估发现主要的错配修复基因正常表达。PCR分析结果则无法解读，因为肿瘤细胞数量不足（<20%）。患者接受了手术和12个周期的辅助化疗。

半年后，患者出现肝脏复发，并进行了左肝切除术和化疗。然而，3个月后，CT扫描显示病情进展，采用靶向治疗后病情仍有进展。因此，研究人员决定使用液体活检和存档样本开展NGS分析。

组织样本的结果显示，微卫星不稳定性高（MSI-H），肿瘤突变负荷高（TMB-H，17.65个突变/Mb），并带有BRAF V600E突变，而液体活检证实了MSI-H、TMB-H和BRAF V600E突变状态。

根据MSI-H的检测结果，这名患者入组临床试验，接受了34个月的atezolizumab（阿替利珠单抗，PD-L1阻断剂）治疗，获得了部分缓解（76%）和完全代谢缓解，治疗耐受性极佳。

面对这些不一致的结果，研究人员用肝转移样本进行了MSI分析。NGS结果显示MSI-H表型，但IHC结果显示为微卫星稳定型（MSS）。病理学家和生物学家对该病例进行了讨论，并对MLH1进行了体细胞高甲基化分析，结果显示为阴性。因此，他们认为患者携带MSI-H肿瘤。

在确认MSI-H结果后，他们又开展了生殖系分析，发现MSH2基因存在突变。分析结果证实了该变异的致病性，他们认为患者患有林奇综合征。2024年1月底开展的评估显示，患者表现出完全代谢缓解，因此决定停止免疫治疗。

对于这名年轻的结肠癌患者，IHC/PCR和NGS的MSI分析结果不一致。“进展期开展的NGS panel分析产生了MSI-H和TMB-H结果，这为免疫治疗提供了可能性，并取得了令人印象深刻的结果，”作者在文中写道。

研究人员认为，在初次诊断时，可能是由于标本细胞度（<20%）或粘液组织学的原因，导致MSI结果为假阴性。多亏了癌症中心的NGS平台，他们才发现患者存在MSI-H肿瘤。随后，他在篮子试验中接受了atezolizumab的治疗，这在当时是唯一的机会。

他们总结道：“在遇到结果不明确的情况时，当务之急是咨询生物学家和遗传学家，因为准确的诊断有可能改变患者的生命。如果无法对肿瘤组织进行直接测定，cfDNA不失为一种选择。”

原文检索

Rodriguez JE, Vasseur D, Bani MA, Cabaret O, Cotteret S, Muleris M, Golbarg V, Malka D, Pudlarz T, Caron O and Smolenschi C (2024) Case report: Microsatellite instability determination is not always black and white in Lynch syndrome diagnosis. Front. Oncol. 14:1396869. doi: 10.3389/fonc.2024.1396869