安捷伦全新ProteoAnalyzer自动化电泳:蛋白质分析不可或缺的工具

【字体: 时间:2024年05月29日 来源:生物通

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  全球分析与临床实验室技术领域的领导企业安捷伦科技(Agilent Technologies)参加了第二十三届中国生物制品大会,并带来了相关领域的众多分析测试解决方案新品。在安捷伦展台,生物通也采访到了安捷伦自动化电泳产品经理林雪梅博士与安捷伦诊断与基因组学及细胞分析事业部大中华区高级市场经理黄妤女士,与二位一起探讨了安捷伦针对生物制品检测的先进技术与前瞻趋势等话题。

  

   国内生物医药领域历史最悠久、学术水平最高、影响力最大的学术盛会之一——第二十三届中国生物制品大会(CBioPC2024)于五月中旬首次落地广州。共和国勋章获得者、中国工程院钟南山院士,中国食品药品检定研究院张辉副院长,中国医药集团有限公司赵炳祥总经理,广州开发区管委会邵静波副主任致开幕辞,国家、省、市政府部门、行业协会、国内外生物医药领域与科研院所的专家学者、企业代表共8000余人出席会议,盛况空前。

   全球分析与临床实验室技术领域的领导企业安捷伦科技(Agilent Technologies)参加了此次展会,并带来了相关领域的众多分析测试解决方案新品。在安捷伦展台,生物通也采访到了安捷伦自动化电泳产品经理林雪梅博士与安捷伦诊断与基因组学及细胞分析事业部大中华区高级市场经理黄妤女士,与二位一起探讨了安捷伦针对生物制品检测的先进技术与前瞻趋势等话题。

安捷伦ProteoAnalyzer自动化电泳,“高效、可靠、灵活”的新一代蛋白质分析方法

   本届展会,安捷伦在展台展示了一系列针对生物制品检测的先进方案,其中最亮眼的产品当属公司发布不久的ProteoAnalyzer蛋白质自动化毛细管电泳仪。这款新平台简化了复杂蛋白质混合物的分析流程,并提高了其分析效率,而这项分析是生物制药、生物技术、食品分析和学术界分析工作流程的核心。

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安捷伦现场展示的ProteoAnalyzer自动化毛细管电泳仪

   据林博士介绍,这款ProteoAnalyzer毛细管电泳仪保持了与公司之前一款成功的产品——Agilent Fragment Analyzer(片段分析仪)——的结构一致,并通过自动化平行毛细管电泳十二烷基硫酸钠,简化了10-240kDa大小范围内蛋白质的分离——包含更具挑战性的样品在内。因此,ProteoAnalyzer能分离定量的蛋白质范围更大、种类更多——例如抗体、分泌蛋白、膜蛋白以及粗裂解物等。

   关于这款产品的优势,林博士总结为几点——

   首先,ProteoAnalyzer定量范围更大、更精准。跟传统SDS-PAGE电泳相比,ProteoAnalyzer达到了三个数量级的定量范围,用户可以同时检测不同浓度范围内的样品,能够非常有效地检测低浓度的、微量的样品或者杂质。

   尤其是在纯度检测方面,ProteoAnalyzer表现出非常高的准确性。林博士介绍,ProteoAnalyzer能检测到一些用传统方法无法检测的微量的杂质,检测浓度范围更大,这样测出来的蛋白质纯度更准确。

   其次,具有更高通量和灵敏度。ProteoAnalyzer一次运行30分钟可平行分析12个样品,仅需4个小时即可完成96孔板分析。此外,它的高灵敏度能检测到最低1ng/µl的BSA蛋白。

   特别是,配合近年来客户对自动化的要求,ProteoAnalyzer的自动化程度更高。只要用户准备好样品,一天24小时都可以自动操作,能够更快速高效得到可靠的蛋白质分析结果。

    另外,在ProteoAnalyzer所配置的数据分析软件ProSize提供的电子数据能帮助实验人员加快结果分析和方便存档。软件中,用户能够得到比传统蛋白电泳更丰富的数据,其中包括三种数据可视化方法,比如数字化胶图、交互式电泳图、单独参数等,这个单独参数可以自定义样品分析,有助于评估复杂样品,加快质量控制决策等。

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ProSize软件说明图


大大提升自动化程度,新手也能快速上手

   林博士介绍,ProteoAnalyzer有一个非常大的优点,就是灵活性高。 ProteoAnalyzer配有自动化的溶液填充装置,能够在每一次分析之间有效地清洁和活化毛细管,这不仅确保检测的准确性,也扩展了检测多种非常复杂的样品的能力,包括细胞裂解液、或者培养液的上清,也包括抗体样品、纯化蛋白质等。因此,ProteoAnalyzer能应用到非常多不同的场景中,不需要配备其他特殊设备。此外,ProteoAnalyzer能检测在2~2000ng/µl的浓度范围内的多种样品,所以只需要制备该浓度范围内的样品,就可以进行分析。

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林雪梅博士在大会卫星会议上介绍安捷伦ProteoAnalyzer自动化毛细管电泳仪

   更重要的是,ProteoAnalyzer是自动化的电泳系统,在自动化方面有很大的突破。比如,相比SDS-PAGE传统方法,它是不用制胶的,手动操作时,只需把样品和荧光标记溶液加到96孔板上进行加热就可以,蛋白质的分离和检测同步进行,没有染色脱色步骤。其操作流程可以简化为几个步骤:

   1、 准备系统:添加凝胶和活化溶液,更换电泳缓冲液,排空废液瓶;
   2、 在96孔板里对样品进行荧光标记;
   3、 设置软件,开始运行,之后在ProSize数据分析软件中得到数字化结果。

   可以看到,ProteoAnalyzer的整个操作流程流畅简单,非常高效,能够无缝接入现有工作流程。

   安捷伦一直跟很多制药企业、生物技术公司有长期稳定的合作。新品研发之前,公司已跟客户进行多轮深入交流,了解在蛋白质分析中最需要解决的痛点是什么。在交流过程中,双方发现大家一致的要求是需要实现检测流程的自动化,以及检测数据的数字化。因此,安捷伦把这两个需求放在了我们研发的重点上,开发了ProteoAnalyzer这款自动化程度高、非常高效、可靠和灵活的蛋白质分析仪。


高通量 高灵敏度 蛋白分析的加速器

   林博士介绍,ProteoAnalyzer可以分析多种蛋白质样品,且主打自动化,所以广泛适用于科研单位、生物制药企业、合成生物工业、蛋白质技术服务平台、食品工业、蛋白质工程的相关研究工作,研究人员会明显感受到ProteoAnalyzer带来的便利和快捷,特别是当用户每天需要检测的样品量比较多的时候,ProteoAnalyzer能起到一个非常关键的提速、提质的作用。由于ProteoAnalyzer的灵敏度比SDS-PAGE更高,所以需要检测微量杂质或者需要精确纯度的场景,都适合利用ProteoAnalyzer来进行。

   针对这款新品,我们也提问了更多的问题,比如:

问:荧光标记替代染色脱色,有哪些优点、如何避免干扰呢? 

林雪梅:荧光标记非常稳定,灵敏度高,而且能给出定量的信息。与其他类似毛细管电泳系统相比,ProteoAnalyzer的荧光的系统峰会出现在6kDa低位内标之前,避免了干扰,所以能保障在10~240kDa之间完整的检测范围。

   从操作上来说,这种荧光标记也很简单,只需在96孔板里通过10分钟的加热进行标记,冷却后可以直接将样品板加入到ProteoAnalyzer系统中进行检测,通过荧光检测器可以达到三个数量级的浓度范围内高度的定量线性度,这比一般的PAGE跑胶再染色更简单精确一些。

问:ProteoAnalyzer可重复性怎么样?   

林雪梅:在合适的温度和湿度条件下,连续测三个96孔板的结果都是非常稳定的,重复性非常高,能够大大提升实验室效率。测试中我们用ProteoAnalyzer宽范围蛋白质P240试剂盒中的蛋白质Ladder进行了24次连续跑样,检测出8个蛋白质峰,其分子量大小的变异系数小于3%CV,每个峰相对浓度的变异系数小于6%CV,峰高的变异系数小于12%CV。  

问:ProteoAnalyzer配置的分析软件还有哪些特别之处?

林雪梅:除了能全自动分析结果之外,ProteoAnalyzer的分析软件ProSize可以看到实时电泳峰。平时跑蛋白胶我们只能看到考马斯染色的蛋白条带图,但是在ProSize上,我们可以同时看到电泳图和电子胶图,并且电泳图可以放大,可以看到微量杂质或降解物的低信号峰,或者分子量相近的蛋白分离峰。这些优点和SDS-PAGE相比的话也是非常突出的。


完整的蛋白质分析解决方案

   提及目前蛋白质分析领域的挑战,林博士认为,挑战主要是蛋白质本身的复杂性和多样性。

   针对此,安捷伦对应的举措是,提供相当广泛的蛋白质研究工具和蛋白质检测工具。黄妤女士展开介绍到,安捷伦一直致力于为研究界提供探索复杂与多样的蛋白质的各种解决方案,包括但不限于色谱、质谱、光谱、电泳、流式细胞仪、酶标仪、多功能成像、细胞分析、基因编辑、二代测序样本处理、高通量和自动化仪器、合规软件与实验室智能化和信息化方案及仪器服务等一系列产品及相关服务。除了今天展示的ProteoAnalyzer,酶标仪和洗板机结合,可以为ELISA蛋白的检测提供自动化方案;安捷伦BioTek Cytation细胞成像多功能微孔板检测系统,可以实现蛋白共定位等定性和定量分析;RT-CA实时无标记细胞分析技术、Seahorse细胞能量代谢分析可以用于包括蛋白抗体等在内的药物对细胞活性与能量代谢的影响分析;安捷伦的流式细胞仪,以及最新推出的光谱流式细胞仪可以在细胞学水平研究蛋白标志物、抗体及其表达水平与细胞的关系。除此之外,安捷伦也提供针对蛋白质的突变体库、基因编辑工具、模块化的载体工具和丰富的感受态细胞,这些都是蛋白质研究工作者在基础科学领域必须用到的一些工具。

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安捷伦蛋白质分析解决方案

   在合作开发方面,黄妤女士介绍到,安捷伦已经跟一家全球领先的蛋白质组学公司SomaLogic达成合作,开发基于安捷伦微阵列芯片的SomaScan高通量蛋白质组学检测技术。去年12月的《Nature》杂志的一项研究中,研究人员就利用SomaLogic蛋白质组学检测技术,对来自5个队列5千多名参与者,进行了血浆蛋白质组学分析,确定了器官衰老和疾病的血清学指标,并开发了一种研究器官衰老、预测疾病和衰老效应的器官特异性模型,这个例子证明安捷伦可以在科学研究层面和合作开发层面提供广泛的蛋白质检测技术支持。


多种方式提供有力支持,始终与生命科学研究人员在一起

   在采访前,我们也从网站征集了读者感兴趣的问题,其中被提问最多的就是安捷伦有哪些支持生命科学领域研究人员的奖项。对此,黄妤女士饶有兴致地展开做了介绍。

   她提到,安捷伦设置的奖项很多,主要有三大类奖项,第一类是“安捷伦思想领袖奖”,这个奖是颁给全球范围内、在生命科学、诊断、还有分析化学领域的权威思想领袖。安捷伦为其提供科研经费、提供产品和专业的技术服务以支持他们的研究。截止目前,中国累计已有7位顶尖科学家荣获这项殊荣,最新的获奖者是中国科学院深圳先进院刘陈立研究员,去年,安捷伦为其颁发此奖,以此表彰他在合成生物学领域的突出的贡献。

   第二类是ACT-UR项目,就是“安捷伦应用和核心技术大学研究项目”。每年,安捷伦会为一些专业领域有想法的中青年研究人员提供支持,支持他们早期的、前沿的一些研究课题。举例而言,在国内,近期的一个项目是2024年安捷伦支持大连化物所合成微生物学研究所的周雍进博士团队,期待未来共同探索甲醇生物转化和合成生物学工具开发等广泛的领域;2023年,安捷伦支持了西湖大学曹龙兴博士团队,主要关注他们进行的蛋白质设计领域的相关研究,助力开发全新结构和功能的蛋白质;同年,安捷伦还资助了坪山中心的深圳湾实验室的李子刚博士团队,支持他们在创新生物药领域的研究。

   第三类是大学奖学金。例如2023年安捷伦支持的大学奖学金项目,包括在浙江大学的杭州国际科创中心设立奖学金,用于培养前沿创新人才的专项专用;在北京化工大学设立奖学金,用于支持生命科学领域的人才培养;在厦门大学生命科学学院设立奖学金,助力生命科学领域优秀人才培养。


“您的研究从未停下向前的脚步,您的研究方法又怎能一成不变?”

感谢安捷伦带来为广泛蛋白质样本提供精确、准确自动化质控解决方案的新一代分析工具,以及一直以来在科学研究层面和合作开发层面提供的广泛的蛋白质检测技术支持,让研究人员有机会从繁琐的实验操作中解放出来,更轻快地探索科学的奥秘。


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