类风湿关节炎B细胞免疫调控新机制：栗占国、胡凡磊团队与清华大学合作研究成果在权威杂志发表

　　

2024年2月1日，北京大学人民医院风湿免疫科栗占国、胡凡磊教授团队和清华大学生命学院免疫所刘万里教授团队在风湿病领域TOP 1期刊《风湿病年鉴》（Annals of the Rheumatic Diseases，IF：27.4）发表题为《TNF-α引起B10细胞炎性转变促进类风湿关节炎发病》的研究论文。

研究发现，在类风湿关节炎（RA）患者中B10细胞数量降低，并发生炎性转变，分泌促炎因子IFN-γ和IL-17A，而抑炎因子IL-10产生明显减少，且此类炎性B10细胞的比例和数量与RA患者临床严重程度呈现明显正相关；RA患者中高表达的TNF-α是调控B10细胞数量和功能的核心调控因子，TNF-α通过抑制B10细胞分化所需元件SHIP-1而破坏B10细胞的稳定性和分化；靶向TNF-α的生物制剂可以恢复B10细胞的免疫抑制表型，从而发挥针对RA的治疗效果，为药王TNF-α生物制剂在自身免疫病领域靶向治疗的巨大成功提供了新的免疫学解释。

RA是一种高致残性自身免疫病，以慢性破坏性关节病变为主要特征，并涉及全身多个脏器。目前，我国有超过500万的RA患者，但其发病机制尚不完全清楚。靶向TNF-α的生物制剂具有显著的RA治疗效果，素有药王之称，但部分患者会出现药物抵抗。因此，探究RA发病机制以及TNF-α靶向生物制剂的治病机理是临床免疫学以及基础免疫学关注的重点和难点问题。

识别自身抗原的自反应性B细胞的异常活化和RA的发生发展密切相关，其突破免疫耐受后产生的一系列自身抗体是RA疾病的生物标志物。临床治疗方面，应用CD20单抗清除B细胞可以发挥显著的治疗效果，进一步证实自反应性B细胞在RA发病中的地位。

近些年来，与自身免疫病相关的一些新的B细胞亚群不断被鉴定，包括但不限于年龄相关B细胞（Science 383:413-421, 2024；Ann Rheum Dis 81:1504-1514, 2022），亮氨酸tRNA合成酶2高表达的B细胞（Immunity 55:1067-1081, 2022），非典型记忆性B细胞（Ann Rheum Dis 78:1090-1100, 2019），分泌IFN-γ、IL-17A等炎性细胞因子的B细胞（Cell Res 24:161–76, 2014; Nat Immunol 14:514–22, 2013; Signal Transduct Target Ther 7:105, 2022）等。分泌IL-10的B细胞又被称为调节性B10细胞，是目前功能较为明确，研究较为透彻，跟自身免疫病较为相关的一类调节性B细胞亚群（J Immunol. 199:3063-3073, 2017；Am J Pathol. 180:2375-85, 2012；J Immunol. 184:3321-3325, 2010）。在小鼠中，B10细胞的表面标志物已经被鉴定，目前公认CD19+CD5+CD1dhi的B细胞具有明确的B10细胞表型和功能；在人体中，CD19+CD27+CD24hi的B细胞被认为具备B10细胞的特征。然而B10细胞的关键调控因子及其分子机制并不清楚。

围绕上述问题，论文作者通过RA患者随访队列建立，RA患者临床标本检测，一系列基因敲除小鼠免疫分析，单细胞及转录组数据分析，以及针对关键因子的生化分子实验等，证实RA患者B10细胞数量降低，并且留存的B10细胞展现炎性转变，分泌促炎因子例如IFN-γ和IL-17A，而降低抑炎因子IL-10产生，且此类炎性B10细胞的比例与RA病情呈正相关。

进一步研究发现，RA患者高表达的TNF-α是调控B10细胞数量和功能的关键因子。TNF-α抑制B10细胞的糖酵解，从而抑制其增殖；TNF-α引起B10细胞炎性转变，上调分泌IFN-γ和IL-17A。针对RA患者外周血单细胞数据库的分析，进一步揭示RA患者的炎性B10细胞在趋化因子通路、IL-17信号通路、TLR信号通路、破骨细胞分化通路等过度活化。针对B10细胞的转录组测序筛选及进一步分子机制研究揭示，TNF-α可以抑制论文作者前期鉴定的B10细胞免疫分化所需元件SHIP-1（J Immunol. 199:3063-3073, 2017），从而破坏B10细胞的稳定性和免疫分化。更为重要的是，随访队列研究发现，接受靶向TNF-α的生物制剂治疗后的RA患者，其体内B10细胞的水平显著升高，而且B10细胞的炎性状态也被逆转，恢复IL-10分泌这一重要免疫抑制表型，从而缓解RA患者症状。

综上，本论文进一步促进了对于B细胞尤其是B10细胞在自身免疫病中的作用及机制的认识。本论文揭示了TNF-α的靶向生物制剂针对RA疾病能发挥临床治疗效果的免疫学新机制，该机制也值得在TNF-α抑制剂发挥治疗作用的其他自身免疫病中进行进一步检验。更重要的是，虽然有临床前研究显示，体外扩增的B10细胞可以用于治疗RA及多发性硬化等疾病，我们的研究结果提示，应用自体扩增的B10细胞用于临床治疗RA等自身免疫疾病需要非常谨慎，它们可能因为发生炎性转变而促进疾病的进展。

论文原文链接：

https://ard.bmj.com/content/early/2024/02/01/ard-2023-224878

北京大学人民医院风湿免疫科/风湿免疫研究所胡凡磊研究员和北京大学首钢医院风湿免疫科石连杰副教授为论文的共同第一作者，北京大学人民医院风湿免疫科/风湿免疫研究所栗占国教授、胡凡磊研究员和清华大学生命学院免疫学研究所刘万里教授为论文的共同通讯作者。

该研究得到国家自然科学基金重点和面上项目、北京市科委专项、北京市风湿免疫重点实验室、北大-清华生命科学中心（CLS）以及天然药物及仿生药物国家重点实验室等基金的资助。

专家介绍

主任医师，教授，博士生导师，北京大学人民医院临床免疫中心主任，风湿免疫研究所所长，北京大学临床免疫中心主任，973首席科学家，国家杰出青年基金获得者和吴杨奖获得者。

中华医学会风湿病学分会前主委，国际风湿病联盟（ILAR）及亚太风湿病联盟(APLAR)前主席，中国免疫学会自身免疫分会主任委员，WHO骨与肌肉疾病委员会(ICC)委员，《Rheumatology & Autoimmunity》主编、《中华风湿病学杂志》总编，《Clin Rheum》、《IJRD》和《北京大学学报》(医学版)副主编，《Lancet Rheum》等杂志编委。在Nat Med及Science等发表SCI论文430余篇，引用逾16,000次，爱思唯尔中国高被引学者。主编/译《类风湿关节炎》,《风湿免疫学高级教程》,《凯利风湿病学》等专著20余部。

研究员，博士生导师，北京大学人民医院风湿免疫研究所副所长，国家级青年人才，北京市科技新星。北京大学人民医院科研处副处长。

中国免疫学会自身免疫分会副秘书长，常委，中国免疫学会青年工作委员会委员，Endocr Metab Immune杂志专栏主编，Front Immunol、Exp Ther Med杂志编委。以第一/通讯作者在Nat Commun及Ann Rheum Dis等发表SCI论文50余篇；承担国自然、北京市科技新星交叉学科合作课题等项目10余项；申获（请）国家发明专利8项，并实现专利转化1项；获高校科技进步奖一等奖、北京医学科技奖一等奖、中国免疫学会青年学者奖等奖励。

（北京大学人民医院）