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Takara首款商用可溶性微流体慢病毒转导增强剂
【字体: 大 中 小 】 时间:2024年12月10日 来源:Takara
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Lenti-X Transduction Sponge是一项可以在不使用微流体仪器的情况下实现微流体驱动的提高慢病毒转导效率的新技术。它能够高效转导广泛细胞类型,包括常见细胞系和难转导的原代细胞。
Takara Bio USA, Inc.,Takara Bio Inc.全资子公司宣布推出Lenti-X™ Transduction Sponge(Code No. 631478),这是一款新上市的可溶性微流体转导增强剂,是对体外慢病毒介导的基因导入技术的一种创新。Lenti-X Transduction Sponge的工作流程简单易用,可在广泛细胞类型中实现高转导效率,助力基因和细胞治疗领域的下游研究应用。
产品介绍
Lenti-X Transduction Sponge是一项可以在不使用微流体仪器的情况下实现微流体驱动的提高慢病毒转导效率的新技术。一块海绵不仅可以转导105-107个细胞,而且不需要进行耗时的spinoculation操作,也不需要使用为了保持细胞活力需要进行优化的化学转导增强剂。Lenti-X Transduction Sponge能够高效转导广泛细胞类型,包括常见细胞系和难转导的原代细胞。
Lenti-X Transduction Sponge是一种微流体海绵,由钙离子交联的海藻酸盐制成,这是一种符合GMP标准、FDA批准的生物材料,具有高生物相容性和低毒性的特点。交联的海藻酸盐经过温和的冷冻凝胶化过程,形成孔径均匀、大小在20-300 μm的海绵,这种大孔藻酸盐结构,可以促进快速有效的慢病毒转导。它能够促进靶细胞和慢病毒的共定位,消除常用慢病毒转导方法所带来的的生物转运问题。简单易用的操作流程减少了对细胞的处理,需要的总反应体系更小,产生的转导效率与传统方法相当或优于传统方法。
产品特点
这是一个更好的标准慢病毒转导方法的替代方案。
在不需要使用基于微流体仪器的情况下,实现微流体驱动的慢病毒转导效率的提高
跳过额外需要离心设备的劳动密集型、耗时的spinoculation操作
一个海绵可以在24孔板的一个孔中转导105-107个细胞
简便易用的操作流程适用于多种细胞类型(包括常规细胞系和原代细胞)
终结对化学增强剂(如polybrene)的依赖,这些增强剂对某些细胞类型有毒性作用,并且需要在转导期间和转导后进行优化以保持细胞活力
实验例
1. 方便的适用于24孔组织培养板的形式。
Lenti-X Transduction Sponge可安全地取代并解决spinoculation、化学增强剂和微流体设备固有存在的一些问题。这种转导海绵由具有高生物相容性的钙离子交联海藻酸盐制成,通过在大孔3D结构共定位靶细胞和病毒来提高转导效率。转导后,通过使用所提供的特定缓冲液溶解海绵,细胞会被温和地释放出来,释放出的细胞保持高细胞活力和很好的细胞表型。简便易用的工作流程能够更大限度地提高众多靶标细胞的转导效率,包括人原代T细胞、CD34+造血干细胞、自然杀伤细胞、悬浮和贴壁细胞系。图A展示了每个试剂盒包含24个独立海绵,每个海绵能够促进多达1x107个细胞的转导;图B所示图像是150倍放大的海绵微流体孔隙结构,孔径范围在20-300 μm之间。
2. 实现与spinoculation 转导方法相当的转导效率。
Lenti-X Transduction Sponge在多种细胞类型中促成与spinoculation相当的转导水平。图A. 使用ZsGreen1慢病毒以图中标明的感染复数(MOIs)转导1×106 个Jurkat细胞,分别通过spinoculation和Lenti-X Transduction Sponge进行转导。Spinoculation培养物在8 μg/ml polybrene存在情况下,以1400xg 32℃离心90 min。转导48小时后通过FACS分析ZsGreen1的表达确认转导效率。图B. 为了进一步比较海绵转导与Spinoculation (图中的“Spin”),使用ZsGreen1慢病毒以不同MOIs转导了多种细胞类型,操作与图A所述相同。从这两组实验结果可以看出,在Jurkat、THP-1、U937、K562、EL4、Raji、11PO-1这些细胞类型上,Lenti-X Transduction Sponge的转导效果与spinoculation相当或者略高。
3. 保持细胞活力的同时提高T细胞转导效率。
Lenti-X Transduction Sponge有效提高原代T细胞转导效率,同时保持良好的细胞活力。图A. 使用MHC四聚体、抗CD3/CD28包被磁珠、Retronectin试剂(RN)+CD3或者仅CD3活化人原代T细胞。图中显示了CD69+表达百分比指示的48小时的活化水平。然后,使用转导海绵以特定感染复数(MOI)转导ZsGreen1慢病毒至1×106个活化细胞,转导24小时。在转导后48小时进行FACS分析确定%ZsGreen1。图B. 通过7-AAD染色和FACS分析测定转导后48小时的细胞存活率。从这两组实验结果可以看出,使用Lenti-X Transduction Sponge转导后,T细胞转导效率最高接近于80%,同时活细胞占比约90%。
Lenti-X Transduction Sponge是一种创新的基于可溶性微流体技术的慢病毒转导增强剂,不仅用户友好度高,而且可与多种细胞类型兼容,像CD34-HSC、NK细胞、T细胞这些类型也是没有问题的。很重要的一点,这项技术在简便易用、更大程度上减少了对细胞的处理和手动操作时间的基础上,可以达到与传统方法相当或优于传统方法的转导效率。有了这款利器的加持,相信会让您的项目研究如虎添翼、虎虎生威。
产品列表
Code No. 产品名称 包装量
631478 Lenti-X™ Transduction Sponge 24 Rxns
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