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考马斯亮蓝染色

考马斯亮蓝染色（Coomassie Brilliant Blue staining）是一种在实验室中广泛使用的蛋白质染色方法，主要用于在聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）后对分离的蛋白质进行可视化。

在实验室中，考马斯亮蓝染色因其快速、简便、低成本和高重现性而被广泛使用。

实验原理

考马斯亮蓝染色的原理基于染料与蛋白质之间的相互作用。染料分子带有负电荷，与蛋白质中的疏水氨基酸残基及SDS处理后的负电荷区域结合，形成蓝色复合物。这种结合主要通过电荷相互作用、疏水相互作用以及氢键和范德华力实现。染色过程中，考马斯亮蓝染料与蛋白质紧密结合，使得蛋白质条带在凝胶上清晰可见，便于后续的分析和定量。

实验简要步骤

① 凝胶准备：

准备蛋白质样品的SDS-PAGE电泳。

② 染色前处理：

用去离子水冲洗凝胶去除SDS和电泳缓冲液。若凝胶上有琼脂糖也需去除。

③ 染色液准备：

通常配方为0.1% Coomassie Brilliant Blue G-250在50%甲醇和10%冰醋酸的溶液中。

④ 染色：

将凝胶浸入染色液中，摇床震荡确保凝胶与染色液充分接触。染色时间可以从30分钟到几小时不等，具体取决于蛋白质的量和染色液的浓度。

⑤ 染色增强（可选）：

为了增强染色效果，可以将染色后的凝胶在染色液中加热，例如在微波炉中加热30秒到1分钟。

⑥ 脱色：

染色完成后用脱色液（通常为10%甲醇和7%冰醋酸的溶液）替换染色液进行脱色，直到背景清晰，蛋白质条带明显。

⑦ 存储凝胶：

如果需要，可以将成像后的凝胶保存在脱色液中，以防止染料进一步扩散。

⑧ 注意事项

操作时应穿戴适当的个人防护装备，如手套和护目镜，因为染色液和脱色液可能对皮肤和眼睛有刺激性。

考染胶成像

脱色完成后，可以使用百晶G520M和Eagle Chemi多功能成像分析系统，得到高质量考染胶图！！

考染胶成像结果展示

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