NEB特辑 | 如何实现在几分钟内完成去糖基化反应？

目前，越来越多的抗体和抗体融合蛋白被用于治疗。在 IgG 中，Fc 区 Asn297 处的保守 N-糖链对其功能活性至关重要。此外，一些抗体还具有额外的 N-糖链，与 Fc 区 Asn297 处的保守位点一起影响抗体的识别、半衰期和免疫反应。

然而抗体糖基化是多种多样的，细胞培养过程中的各种变量都可能导致糖链多样性的增加。因此，在生产过程中监测糖蛋白的糖基化状态对于获得正确的糖蛋白形式是很有必要的。

PNGase F 是一种广谱特异性的酰胺酶，广泛用于从糖蛋白中去除 N-糖链。PNGase F 消化是大多数实验流程中关键的第一步，在生物制药行业中变得越来越重要。

Rapid™快速 PNGase F

Rapid™快速 PNGase F 是一种经过优化的重组试剂，可在几分钟内迅速将抗体和融合蛋白完全去糖基化，同时能够迅速且无偏嗜性地去除所有 N-糖链，产物可直接进行下游的色谱或质谱分析。Rapid™快速 PNGase F 简化了实验流程，可在保证灵敏度和重复性的前提下减少实验时间。

产品优势

1 数分钟内将抗体和免疫球蛋白融合蛋白完全去糖基化。

2 迅速无偏嗜性地去除所有的 N-糖链，可用于下游色谱或质谱分析。

3 贮存条件得当，可保证 12 个月的最佳活性。

4 经 SDS-PAGE 检测产品纯度可达到 99% 以上均一性。

5 重组来源。

来看实例！

01 抗体经Rapid™快速 PNGase F 处理前后的 ESI-TOF 分析结果：

02 Rapid™ 快速 PNGase F 切割完全且无偏嗜：

A: 阴性对照（negative control）质谱分析图展示了小鼠单克隆抗体重链的糖型。B 和 C：使用 PNGase F去糖基化处理小鼠单克隆抗体重链 1 小时或 16 小时并不能完全去除所有 N-糖链。D 和 E：使用 Rapid™ 快速 PNGase F (NEB #P0710) 或 Rapid™ 快速 PNGase F（非还原形式）(NEB #P0711) 进行去糖基化，可高效、无偏嗜地完全去除所有 N-糖链。

NEB 可提供多种形式的 PNGase F，是糖蛋白分析的首选！

NEB 可提供种类齐全的糖蛋白质组学酶工具产品：

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