母乳中早期乳腺癌的检测

　　

• Vall d’hebron肿瘤研究所(VHIO)是Vall d’hebron校区的一部分，该研究所的研究人员发现，在怀孕期间或产后确诊的乳腺癌患者的母乳中含有循环肿瘤DNA，这些DNA可以在未来用于早期诊断肿瘤。

• 这些患者的预后通常很差，因为诊断是在肿瘤处于晚期时做出的，在技术上更难以发现，而且由于这些妇女的年龄，她们没有被纳入人口筛查规划。

• 这项研究的结果已经发表在杂志上癌症的发现,这是因为一位乳腺癌患者担心在母乳喂养期间将疾病传染给她的婴儿，以及各种赞助倡议和资助支持这项研究的团结一致。

VHIO的研究人员由克里斯蒂娜·绍拉博士领导，她是VHIO乳腺癌小组和瓦尔德希布伦大学医院乳腺科的负责人。VHIO基因组学实验室主任Ana Vivancos博士首次证明，乳腺癌患者的母乳中含有肿瘤DNA，即循环肿瘤DNA (ctDNA)。该ctDNA可通过母乳液体活检检测到，有望成为产后乳腺癌早期诊断的新工具。这项研究的结果刚刚发表在《癌症发现》杂志上。

瓦尔德希伯伦大学医院乳腺科设有一个专门的多学科部门，为怀孕期间或产后诊断为乳腺癌的妇女提供治疗。Saura博士解释说:“在这个部门运营的这些年里，我们观察到，在怀孕期间，特别是在产后被诊断出的乳腺癌患者，预后更差，因为他们在疾病的晚期被诊断出来。”这就是为什么需要新的和有效的早期检测方法来检测这些肿瘤。

“怀孕期间和产后乳房发生的生理变化使肿瘤更难被发现;我们还观察到，从生物学角度来看，产后肿瘤更具侵袭性，妇女在尚未进行乳房x光检查的年龄怀孕。例如，在西班牙，这些检查要到50岁才开始。

一个因为病人的担忧而开始的项目

与其他科学领域不同，生物医学研究依赖于患者的参与、经验和参与，这要么是因为他们慷慨地参加临床试验，要么是因为他们从完全不同的角度向科学家提出问题。

在这个案例中，这是一位在怀第三个女儿时被诊断出患有乳腺癌的患者的担忧。她担心，她在母乳喂养期间将肿瘤通过母乳传给了第二个女儿，这一过程持续了很长时间，直到她被诊断出患有乳腺癌前不久。

“病人”绍拉医生解释说，“给我们带来了她储存在冰箱里的母乳样本。所以，多亏了她，我们的项目开始了，因为虽然我们知道乳腺癌不会通过母乳传播，但我们决定分析样本，寻找可以帮助我们研究的标记。事实上，当我们分析病人的母乳时，我们发现了与她肿瘤中存在的相同突变的DNA。在病人被诊断出癌症之前，母乳已经被冷冻了一年多。”

乳腺癌的液体活检

目前，液体血液活检被用于转移性乳腺癌患者，用于检测或监测某些突变，但作为早期诊断或预测复发的工具，它的灵敏度仍然很低，因为它需要检测到血液中大量的循环肿瘤DNA。

近年来，液体活检已经发展到筛选尿液膀胱癌或唾液头颈癌。Ana Vivancos博士说:“所以我们认为，由于母乳靠近肿瘤，母乳可能是通过液体活检检测肿瘤的另一种来源。”

这篇发表在《癌症发现》杂志上的文章概述了这项研究的初步结果。研究人员从怀孕期间或产后确诊的乳腺癌患者以及正在哺乳的健康女性身上收集了母乳和血液样本。

Ana Vivancos博士解释说:“我们使用两种技术分析母乳和血液样本，即下一代测序(NGS)和液滴数字PCR (ddPCR)。”“我们发现母乳中有肿瘤起源的自由循环DNA。我们能够在分析的15名患者中的13名的母乳样本中检测到乳腺癌患者肿瘤中存在的突变。然而，在同时采集的血液样本中，ctDNA仅在其中一人中检测到。

“没有检测到突变的两名患者的母乳样本是在哺乳的最初几个小时内收集的，而且是初乳，”研究期间癌症基因组学实验室的主要作者和博士后研究员米里亚姆Sansó博士解释说，“所以我们推断，可能没有足够的时间让肿瘤DNA释放到乳汁中。”因此，我们决定在开始母乳喂养至少两周后采集母乳样本。

“我们首次证明，从乳腺癌患者身上获得的母乳含有足够的ctDNA，可以通过液体活检检测到，而且这种ctDNA甚至可以在使用传统成像诊断乳腺癌之前被检测到，”Cristina Saura博士说。

Vivancos博士说:“为了使这一发现具有实际意义，我们的下一步是设计一个基于ngs的基因组小组，作为乳腺癌早期诊断的可能方法。”基于公开的数据，研究人员设计了VHIO-YWBC基因面板，以检测45岁之前诊断为乳腺癌的女性中最常见的突变。该面板的“灵敏度超过70%”。这意味着，在用该小组检测的患者样本中，10例中有7例的特异性为100%。”

Saura博士解释说:“这个小组将来可以作为产后乳腺癌早期诊断的一种方法。”“就像对所有新生儿进行脚跟穿刺一样，也可以考虑在所有女性出生后收集母乳样本进行乳腺癌筛查。”

“我们分析了在产后8个月和11个月的随访中收集的血液和母乳样本，发现研究中包括的高危女性病例进一步强化了使用设计的基因小组和液体母乳活检来促进乳腺癌早期诊断的想法。”这是一位健康的女性，她在46岁怀上第一个孩子时就想参加这项研究。在生下儿子18个月后，作为随访的一部分，她通过乳房超声扫描被诊断出患有乳腺癌，因为在产后11个月，即乳房超声诊断前6个月，患者肿瘤的突变已经出现在受影响乳房的母乳中。我们没有在健康乳房的血液或牛奶样本中检测到突变，因此可以使用这种技术提前六个月诊断出肿瘤，”VHIO乳腺癌组研究员，该文章的主要作者Carolina Ortiz博士和Saura博士总结道。

要确认将母乳作为一种新的液体活检工具在产后早期检测乳腺癌的有效性，下一步就是对数千名妇女进行这种非侵入性检查。根据今天公布的结果，我们正在启动一项研究，从全球5000名40岁或以上怀孕的健康女性中收集母乳样本，或在任何年龄携带增加乳腺癌风险的突变(BRCA1, BRCA2, PALB2, RAD51C/D)。

“我们的研究结果为未来使用母乳作为一种新的液体活检来源打开了大门，可以使用非侵入性技术在产后早期检测乳腺癌，”克里斯蒂娜·绍拉博士肯定道。“在这项技术付诸实践之前，这些结果需要在更多的患者中得到证实，但迄今为止发表的结果令人鼓舞，并为特别敏感的年轻女性和母亲群体的乳腺癌早期诊断提供了一个潜在的新工具。”继续提高乳腺癌患者存活率和治愈率的最好方法是尽早发现它，这是一种新的策略，可以在这方面极大地帮助我们。”

Saura博士解释说:“这项研究之所以成为可能，要归功于乳腺癌患者的参与和支持该项目的各种赞助活动，例如El Paseíco de la Mama，这使我们能够从头开始这项研究。”“多亏了他们，我们才能够生成研究的初步数据，然后将项目提交给竞争激烈的拨款申请。我们目前通过FERO基金会、la Caixa基金会、SEOM、AECC和FIS(卡洛斯三世健康研究所)的竞争性赠款筹集了30多万欧元，用于继续这项研究。”

这项研究工作也得到加泰罗尼亚政府CERCA方案和Investigación国家局资助的Severo Ochoa方案的支持。