体验新一代转染系统——Neon NxT电转染系统

Invitrogen™ Neon™ NxT电转染系统是新一代电转染平台，它采用创新设计简化了哺乳动物的细胞转染流程。生物相容的移液器吸头和缓冲液管中的电极可产生比传统电转染装置更均匀的电场，从而显著提高转染效率和细胞活力。

Neon NxT移液器吸头用作转染室，无需将您的样本转移至单独的电转染比色皿中。通过减少移液的次数可以节省时间，有助于最大限度地减少样本损失，减少细胞受到的剪切力，并降低样本污染的风险。凭借Neon NxT电转染的简单工作流程，您甚至可以满怀信心地转染最具挑战性的细胞系。

使用Neon NxT电转染系统，您可以获得：

• 可靠的性能和极佳的细胞活力—采用我们专有的电转染吸头技术，可帮助您自信地转染具有挑战性的细胞系并保持细胞活力。

• 节省珍贵样本—独特的Neon NxT移液器吸头无需单独的电转染比色皿或孔板，同时该仪器的小巧设计使其能够轻松地安装在生物安全柜内。您宝贵的细胞不会因样本转移而丢失，并降低了污染风险。

• 节省时间—采用相同的缓冲液试剂盒，通过三个简单的步骤转染细胞。只需吸取细胞并将递送物质递送至Neon NxT移液器吸头中，将其置于移液器工作站，按下开始。现在，转染的细胞可以转移至培养容器中。

• 灵活性—针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和应用，精确优化您的电转染参数。每次可转染1×104 至1x107个细胞。

经证实的转染效率

采用我们专有的电转染吸头技术，您可以高效转染具有挑战性的哺乳动物细胞，同时保持高细胞活力。我们观察到了卓越的转染效率（图1）和细胞活力（图2），即使是对于转染极其困难的细胞，如免疫细胞、原代细胞和干细胞也是如此。

图1. Neon NxT电转染系统的转染效率。在10 μL或100 μL电转染反应中，采用GFP质粒DNA或GFP mRNA转染细胞。转染效率为GFP阳性细胞的百分比（n＝3）。注：初始T细胞仅在100 μL反应中进行电转染。

卓越的细胞活力

我们珍视您的细胞。Neon NxT电转染系统能够在更加可控的条件下进行电转染，并省去了两个移液步骤。此外，细胞经受的剪切力也更小，因为它们不需要被移进和移出单独的电转染比色皿，有效降低细胞死亡率，这在处理难以生长或转染的细胞时尤为重要（图2）。Neon NxT电转染系统中的电极间隔较宽，且表面积极小。一次性Neon NxT移液器吸头包含其中一个电极，而另一个电极位于NeonNxT缓冲液管的底部。较小的表面积产生更均匀的电场，并且pH值变化极小。电转染过程中产生的热量和离子较少，因此细胞生理条件不会受到严重干扰。

图2. Neon NxT系统电转染后的细胞活率。在10 μL或100 μL电转染反应中，采用GFP质粒DNA或GFP mRNA转染细胞。用Invitrogen™ SYTOX™红色死细胞染色剂对转染细胞进行染色，并在Invitrogen™ Attune™ NxT流式细胞仪上评估细胞活率。细胞活率（%）以3次测量的平均值报告。注：初始T细胞仅在100 μL反应中进行电转染。

提高基因编辑效率

Invitrogen™ Neon™ NxT 重悬基因编辑缓冲液经专门设计，通过在转染后同源定向修复（HDR）提高基因编辑效率。当与Neon NxT 电转染系统和我们的基因编辑试剂一起使用时，Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液可以帮助改善特定递送物质（如CRISPRCas9）的基因编辑性能，特别是在涉及哺乳动物细胞的敲入实验时，包括原代细胞、干细胞和难以转染的细胞（图3）。

图3. Neon NxT重悬基因编辑缓冲液在基于CRISPR-Cas9的不同细胞类型和靶标的基因编辑实验中的性能。靶位点包括Jurkat和K562细胞的ACTN、活化原代T细胞的TRAC、HSC的B2M和原代NK细胞的AAVS1。在10 _L或100 _L反应中电转染细胞。（A）GFP供体DNA敲入效率报告为GFP阳性细胞的百分比。（B）GFP供体DNA敲入后细胞的活率。（C）敲除效率报告为与未处理对照相比的特定靶位点减少百分比。对于原代NK细胞，通过基因组剪切检测（GCD）测定indel效率（%）作为敲除效率的替代。（D）敲除细胞的转染后活率。

节省研究时间

简化工作流程

在使用仪器时，我们需要一些对于初学者和专家来说都容易使用的操作。 Neon NxT 系统仅需3 个简单的步骤：吸样、电转染和分液。精简的工作流程易于遵循和执行，由此培训花费的时间极少，提高了一致性和可重复性。

缩短处理时间

与常规电转染系统相比，我们专有的电转染技术不仅简化了工作流程，还将整个过程缩短至10-15 分钟[1]。无需盖盖、开盖以及将样本移进和移出单独的电转染比色皿——转染发生在NeonNxT 移液器吸头中。

1 个缓冲液试剂盒适用于多种哺乳动物细胞类型

可省去寻找适用于您细胞系的缓冲液试剂盒的麻烦。通过采用一个与150 多种哺乳动物细胞系兼容的缓冲液试剂盒，我们简化了这一过程。此外，我们还建议在低于1,900 V 的电压下使用Invitrogen™ Neon™ NxT 重悬R 缓冲液，在更高的电压下使用Invitrogen™ Neon™ NxT 重悬T 缓冲液。该套装还包括Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液，可实现出色的基因编辑效率。使用我们优化的方案转染常用细胞系，或按照我们新细胞系的标准流程优化转染方案。

省时的孔板设置

孔板设置模式将效率提升至另一个水平。Neon NxT 电转染系统的直观用户界面为您的电转染实验设置提供了一种有效的方法。您可以预先设置整个孔板，并在对每个样本进行电转染时在屏幕上监控进度，而非使用Quick Start 调整样本之间的电转染参数。

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