为何CAR-T细胞治疗首选慢病毒载体?

【字体: 时间:2023年11月14日 来源:基因有限公司

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  慢病毒载体被认为是同种、异体或自体细胞治疗(如CAR-T)的首选载体,因为它具有将病毒基因组永久整合到宿主细胞DNA中的能力。

病毒载体概述

随着细胞基因治疗和病毒生物学的发展,病毒载体已越来越成为向各种实验系统(如细胞系、原代细胞、组织脏器等)转运核酸的重要工具。

利用基因工程技术对病毒进行改造,成为外源基因运送的载体,其通过感染细胞,将外源基因带入细胞,并进行长期的基因表达。工具病毒载体具有转染效率高且外源基因表达水平高等优点,广泛应用于基础研究、基因疗法或疫苗制备等领域。

目前主流的病毒载体系统主要包括慢病毒(LV)、腺病毒(ADV)和腺相关病毒(AAV)。

三种病毒载体系统的比较:

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从表格中我们可以看出,慢病毒载体相较于其他两种载体来见它既可整合到基因组又可携带大片段外源基因。因此,慢病毒载体被认为是同种、异体或自体细胞治疗(如CAR-T)的首选载体,因为它具有将病毒基因组永久整合到宿主细胞DNA中的能力。为了生产这些载体,细胞疗法生产商通常使用在工艺开发阶段扩大规模的瞬时转染系统。

Polyplus-transfection®——FectoVIR®-LV

专为慢病毒载体生产的转染试剂

FectoVIR®-LV特点:

新一代转染试剂,不含动物成分;

旨在提高HEK-293细胞系统中的LV产量;

适用于大规模生产,可减少络合体积,提高络合物稳定性,降低LV的制造成本。

应用数据:

1. FectoVIR®-LV可提高慢病毒载体的生产力

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在HEK-293和衍生细胞中,使用第三代质粒系统生产用于细胞和基因治疗的慢病毒载体。根据最佳滴度选择转染试剂是过程经济和强化的必要条件。与其他市售慢病毒特异性转染试剂相比,FectoVIR®-LV的功能滴度提高了3倍。

2. FectoVIR®-LV采用DOE方法降低慢病毒载体的制造成本

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提高滴度是增加每批剂量数和降低每批成本的关键参数之一。可减少额外的关键原材料的消耗,如DNA的数量,整体制造等成本。FectoVIR®-LV既可以提高生产力,又可以减少2倍的DNA消耗。Polyplus提供全面的DOE服务,以优化转染步骤的关键参数,以达到更高的滴度。

3. FectoVIR®-LV可增加生产规模不受转染混合物的限制

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大规模瞬时转染面临着在最佳时间框架内转移转染混合物的挑战。转染试剂需适合大规模生产,否则可能产生限制。FectoVIR®-LV可提高复合物的稳定性,减少复合物的体积,从而有足够的时间将混合物转移到大型生物反应器中(200 L)。

Polyplus-transfection

为病毒载体生产专用转染试剂

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FectoVIR-LV GMP级别的在开发过程中,敬请关注产品上市......

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转染实验小贴士:

做转染采用的质粒一定要用去除内毒素,否则可能会很大程度地影响转染效率,导致结果失败!

内毒素:是革兰氏阴性菌的细胞膜上的一种脂,伴随着细胞的死亡会大量的释放出来,如果进入到细胞内的话会影响细胞活性。

基因有限公司

基因有限公司代理Polyplus转染试剂,提供适合用于病毒生产、蛋白/单抗生产、非病毒载体的体内转染及生命科学研究(各种核酸转染)四大产品线相关转染试剂。

如有问题或需求,欢迎扫码添加MN产品专员咨询!

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