新品！Gibco StemScale 悬浮培养基，高效扩增5-10倍

一款无需微载体、无需滤网的PSC悬浮培养基，使用者真实反馈，扩增效果优异，操作简单。

随着多能干细胞（PSC）被越来越广泛地用于研究、药物发现和治疗应用领域，对使用稳健且经济有效的方式生产大量高质量细胞的需求变得越来越迫切。悬浮培养的总体成本更低、实验室占地面积更小、手动操作时间更短，并且与封闭系统的兼容性更强。然而，由于细胞扩增能力相对较低、方案繁琐以及跨细胞系生长不一致，当前的悬浮培养系统未达到理想标准。

Gibco StemScale PSC悬浮培养基

一种可扩展、易于使用的培养基，支持在悬浮培养中稳健扩增PSC

• 扩增潜力高 — 每次传代可实现5-10x细胞扩增，使PSC的大规模生产更具成本效益
• 简化的工作流程 — 可在多个细胞系中形成球状体，而无需在培养或传代过程中使用微载体或细胞滤网
• 与多种培养形式兼容 — 可在多种容器形式下进行各种规模的PSC培养：多孔板、摇瓶和生物反应器
• 饲养时间表灵活 — 可以选择每天或隔天饲养培养物，为PSC扩增提供更多自由度

卓越的扩增潜力

• 每次传代可实现5-10倍扩增
• 扩增能力比其他培养基高出3倍
• 在5天内维持最佳球状体大小和活性

图1.StemScale培养基可提供卓越的细胞扩增能力。使用StemScale培养基，在Thermo Scientific™ Nunc™未经处理的6孔板（货号150239）中培养多种细胞系。(A) 在StemScale培养基中开始培养后第1-5天，PSC球状体的形态和生长情况。(B) 在StemScale培养基或其他供应商的培养基M中培养的PSC在传代3次后的扩增倍数。(C) 在StemScale培养基或培养基M中培养的PSC在传代3次后的活性。

简化的工作流程

其他多能干细胞悬浮培养方法（如使用微载体或其他自聚集方法）要求研究人员必须使用细胞滤网处理细胞，或者将细胞与微载体分离。此外，分批补料的细胞饲养方法可能导致废物蓄积过多和培养基体积不一致，从而造成球状体大小不一致。StemScale PSC悬浮培养基采用简化的细胞饲养方法，依靠重力沉降和50%培养基更换策略来实现灵活性，可免于在周末饲养细胞。无需使用细胞滤网进行培养物传代，以免造成细胞损失。

• 灵活的饲养方案—隔日换液，最早可在第3天进行传代
• 50%培养基更换饲养方案—防止废物蓄积，有助于保持球状体大小一致
• 简单的传代方案—无需使用细胞滤网，适合扩大规模，且无需使用微载体

图2.使用StemScale PSC悬浮培养基使贴壁培养适应悬浮培养的简化工作流程。在StemScale培养基中开始培养后，通过交换50%的培养基定期（每天或隔天一次）饲养细胞。生长4-5天后，使用Gibco™ StemPro™ Accutase™细胞解离试剂传代球状体，无需使用细胞滤网。解离的细胞可以继续扩增、在单细胞层中重新铺板以进行特性研究，或冷冻保存。

多种形式的可扩展性

对于需要大量细胞的应用，在不牺牲性能的情况下从较小规模过渡到大型容器非常重要。此外，工作流程必须考虑到规模扩展的灵活性。StemScale PSC悬浮培养基允许从6孔板 过渡到培养瓶和生物反应器，同时保持扩增能力。它能够省去在传代过程中使用细胞滤网的繁琐步骤，因而不会在跨形式扩大规模时造成细胞丢失。

图3.StemScale PSC悬浮培养基可兼容多种容器类型和尺寸。(A) StemScale培养基可在多种容器类型（包括培养瓶和生物反应器）中实现9-12倍扩增。从125 mL到1,000 mL的Thermo Scientific™ Nalgene™培养瓶中，再从Nunc 6孔板到500 mL生物反应器，PSC扩增能力均保持不变。(B)在30次传代和20周培养中，StemScale培养基每次传代均可实现10倍以上的扩增。

细胞系间的一致性以及对高质量细胞的维持

StemScale PSC悬浮培养基可在多种PSC系中促进形成一致的球状体并改善扩增能力，并且可在多次连续传代后维持多能性。PSC悬浮培养的常见挑战包括适应悬浮培养的细胞系生长不一致，以及某些细胞系在从贴壁培养过渡到悬浮培养时无法可靠地形成球状体。StemScale PSC悬浮培养基设计用于提高单细胞向球状体的聚集能力，并最大限度地改善跨细胞系的细胞生长。

图4.一致的球状体生长和多能性的维持。(A和B）在完全StemScale培养基中扩增人ESC和iPSC细胞系。培养5天后，在多个细胞系中观察到一致的球状体大小和生长。(C) 在StemScale培养基中维持Gibco™游离型iPSC以进行连续30次传代，结果显示多能性标记物和正常核型表达>90%。(D) PluriTest™特性研究检测表明，PSC可在5次传代后维持多能性。此外，使用Applied Biosystems™ KaryoStat™检测进行评估，结果表明这些细胞均保持正常核型（数据未显示）。

在StemScale培养基中扩增的PSC球状体的分化能力

经证明，与贴壁方法相比，直接从PSC球状体中分化细胞的能力可节省时间并显著增加细胞数量。

图5.直接从PSC球状体开始分化。在StemScale培养基中扩增后，转移至Gibco™ PSC神经诱导培养基（货号A1647801）中的PSC球状体被分化为具有高表型标记物（HuCD和MAP2）表达的神经元。与贴壁培养的27天相比，仅需11天即可获得相同数量的神经干细胞（数据未显示）。第32天时，可获得与贴壁培养第48天相同数量的成熟神经元。

图6.在StemScale PSC悬浮培养基中生长的球状体成功分化为心肌细胞。(A) 诱导形成心脏前，在StemScale培养基中生长的未分化的hPSC球状体形态。(B) 心脏诱导开始12天后的球状体。(C) 分化后两周，心脏类器官表现出自发性收缩。(D) 心脏标记物α横纹肌肌动蛋白（绿色）和心肌肌钙蛋白T（红色）的类器官染色。细胞核用DAPI（蓝色）染料复染。

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