BioTechniques：如何突破抗体的重复性危机？

　　

抗体，无论对于基础研究还是转化研究而言，都有着巨大的应用潜力。然而，近年来它们也处于风口浪尖，重复性问题引发整个科学界的关注。近日，《BioTechniques》就发表了题为“Antibodies: will their star continue to rise?”的文章。

由于特异性和选择性高，抗体一直被誉为诊断和治疗领域的新星。基于抗体的疗法可预防肾移植时的排斥。针对传染病，一些令人兴奋的项目也在进行当中。最近的临床试验表明，广谱中和抗体有望更好地治疗HIV，而多种Zika抗体也已开发出来，用于检测和治疗Zika病毒。

当然，即使是新星，也并非完美。目前应用于研究的抗体主要有三种：杂交瘤单克隆抗体、重组单克隆抗体以及多克隆抗体。每种抗体都有其自身的优缺点，适用于不同类型的研究。

杂交瘤单抗精确可重复，但在成本、专业和时间方面有着较高的要求。此外，它们的特异性可能会逐渐丧失，因为一些杂交瘤容易发生遗传漂变。重组单抗带来了更好的控制，但在开发过程中对专业知识的要求很高。多克隆抗体能够与多个表位结合，但存在供应量有限的问题，无法严格定义克隆组成，因此可能存在批间差。

然而，所有抗体都普遍存在重复性的问题。人类蛋白质图谱（Human Protein Atlas）计划曾开展了一项抗体可靠性研究。他们检测了5,000多种商业抗体，发现超过50%不能用于说明书上的应用。这会浪费大量的经费和时间，后果很严重。

Abcam公司的产品开发负责人Alejandra Solache博士认为：“目前有许多种抗体鉴定和验证工具，这使得我们能够更好地评估抗体特异性，并实现更精准的蛋白质检测。不过，随着技术的广泛使用，我们发现曾经信赖的一些试剂并没有那么特异。这导致我们开发、测试和使用抗体的方式发生了重大转变。”

Absolute Antibody的业务开发总监Michael Fiebig表示：“杂交瘤的稳定性不大好。如果你今天购买了一个杂交瘤产品，一年内又买了一个，这两者可能大不同。纯度，组成，或者是完全不同的分子。”

与此同时，抗体的销售渠道也很复杂。“抗体市场非常多样化，许多公司只负责转售抗体。你可能不知道你的抗体来自哪里，以及如果使用过程中遇到了问题，你应该去找谁，”Fiebig补充说。

这些问题虽然得到了重视，但接下来何去何从，人们也说不清。有些人建议逐步淘汰多克隆抗体，但其他人不同意。还有人建议生产所有单克隆抗体的重组形式。Fiebig表示：“我们可以利用重组方法来克服单克隆生产过程中的所有问题。未来，我们将看到向重组单克隆抗体的转变，这最终将由终端用户来推动。”

此外，生产商也在想方设法改善他们的产品。“我们最受欢迎的产品是新版本的传统抗体，”Fiebig指出。“许多杂交瘤不稳定，因为它们是B细胞与癌细胞的融合。通过我们正在采用的重组方法，你可以获得精确定义的产品，并避免杂交瘤固有的一些杂质，如额外的轻链或重链。”

使用重组克隆抗体是确保重复性的好方法，而使用敲除（KO）细胞系则是确认特异性的好方法。总而言之，研究人员和生产商需要共同努力，才能选到合适的抗体。Solache解释说：“生产商在生产和验证抗体时需要使用最合适的技术，让研究人员对质量充满信心。研究人员也需要站在科学的前沿选择新型抗体，同时尽量选择文献中确认有效的抗体。”

展望未来，随着技术的不断改进，人们将以新方式去使用抗体，回答新型的科学问题；同时确保抗体经过验证，所得到的研究成果是可以重复的。抗体，这颗新星有望冉冉升起。（生物通 薄荷）

原文检索

Antibodies: will their star continue to rise?

Francesca Lake
BIOTECHNIQUES VOL. 66, NO. 5 TECH NEWS