利用双重sgRNA CRISPR方法纠正遗传性疾病

　　

隐性营养不良型大疱性表皮松解症是大疱性表皮松解症的一种烈性亚型，同时也是一种罕见的脆弱型皮肤疾 病，其特征是在皮肤和内部粘膜上不断形成溃疡、水疱、纤维化以及各种并发症如假性紊乱（手指黏连）， 并有发展转移成鳞状细胞癌的高度倾向。该疾病的控制和治疗对医疗专业人员是一个很大的挑战，而对病患 及其家属而言更是艰难和痛苦。

这种遗传性疾病是由基因COL7A1的突变引起的，该基因编码代表的7号胶原蛋白是黏连真皮和表皮所必需 的蛋白质。

在西班牙，基因的外显子80存在着极高的突变可能性（存在于大约50％的西班牙患者基因中 ），这证明了针对该基因区域的精确疗法发展是正确的。

一组研究人员使用CRISPR/Cas9工具对基因进行重组编辑，纠正患者细胞比例 （超过80％）高得异常的一个基因，结果证明这一工具可准确、安全地去除来自患者皮肤干细胞致病突变基因COL7A1外显子80，使重新编辑的细胞产生胶原蛋白7的功能变体。

这一研究成果公布在Molecular Therapy杂志上，文章作者，Marcela del Río表示，“ 该研究为治疗迅速进入临床阶段奠定了基础。”

在进行这项研究之前，CRISPR/Cas9分子工具还未能达到在成体干细胞（如造血干细胞或皮肤干细胞）中进行实际临床应用所需的功效水平。 因此，此类方案之前并不能与使用病毒载体添加的常规基因疗法抗衡 。

“直到对隐性营养不良型大疱性表皮松解症非病毒基因重组编辑的开发和成功验证，并超过了载体添加的 常规基因治疗效果打破沉寂。”研究人员之一，CIEMAT的Fernando Larcher表示。此外，由于对基因组的其余部分没有不良影响，该疗法被证明是安全的。

原文标题：

Clinically-relevant correction of Recessive Dystrophic Epidermolysis Bullosa by dual sgRNA CRISPR/Cas9-mediated gene editing