你所不知道的CAR-T细胞治疗“套”路（中）

　　

细胞治疗的基本概念在前两期已经有了一个概况给大家了。对于制备CAR-T 细胞来说，其实我们大可以把它分成两块。一块是病毒，一块是细胞。之前已经了解过，CAR-T细胞就是一种拥有人工受体的超强力T细胞，可以快速捕杀癌细胞。

但我们改造普通T细胞的话，仍然需要依托于我们的工具——病毒。

这里的病毒其实不是常常让我们生病的病原体，而是一种基因工程载体。打个比方来说，那就是一台卡车，把我们想要的“货物运送到细胞里面。其次，病毒作为“卡车”，有着它的优势。因为它是寄生生命，所以它会天生有找宿主的特性，可以迅速找到我们需要改造的细胞。

既然说到了卡车，那就必须有它相应的货物。那这个货物到底是什么？对！就是DNA，而且是带人工受体对应基因的DNA片段。DNA进入细胞之后就会生产相应的人工受体，让T细胞变强。

在CAR-T的流程里，首先，我们采用的病毒是慢病毒。慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息，是慢病毒载体系统的主要组成部分。

那么问题来了，到底怎么样把“货物”装载到“卡车”里？

 

图片来源：www.thermofisher.com

在生产研究上，首先，使用基因编辑技术把CAR-T人工受体DNA序列剪切黏贴到慢病毒载体上。而后常常会把慢病毒载体Lentivius vector以分子生物学方法导入到293T宿主细胞里面。在宿主细胞内，病毒载体会利用宿主体内的细胞功能生产复制出自己的RNA跟蛋白质外壳。合成后以萌芽的方式离开细胞。收集细胞培养液即可得到相应的改造后的慢病毒。

在CAR-T细胞治疗上，病毒的改造十分重要。因为病毒的改造会直接影响到CAR-T细胞的作用靶点。而分子生物学的基因编辑是其中十分重要的技术。那怎么才能做好基因编辑呢？

来！告诉你一个简单的套路！

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