钙信号成像:漆黑天幕下的群星闪烁[新品推荐]

【字体: 时间:2017年03月24日 来源:BioTek

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  在生物机体内的错综复杂的信号通路中,钙信号常常作为第二信使发挥其“火炬传递”的功能(例如GPCR信号通路),它的信号波动激发往往在瞬间完成, 并且胞浆钙离子浓度呈规律性变化,在肌肉收缩、细胞分泌、卵子授精、神经传导、个体发育、细胞凋亡等生理病理过程中,发挥关键的调控作用。

宏观世界同微观世界的波动韵律

人类从古至今都沉迷于用眼睛感受来自苍茫宇宙中恒星发出的光芒闪耀,无论是遥远的神话故事还是当下最深邃的现代科技,都在探索这些星光闪耀带给我们的预示和启迪。

而同这些遥远的、宏大的星光恰恰相反,成千上万乃至亿计的细微律动一直在我们身体里循环往复行进着,尽管似乎我们无法用自己的眼睛和双手感知它们,但正是这些真实存在的精细波动,让我们拥有了感受一切的视觉、触觉、听觉、味觉乃至所有的生命活动。

钙信号,正是这些细微波动中最重要的一员。感谢生命科学技术的蓬勃发展,特别是荧光离子探针的出现,我们现在可以在荧光显微镜下观察到这些钙信号的律动和闪耀。在生物机体内的错综复杂的信号通路中,钙信号常常作为第二信使发挥其“火炬传递”的功能(例如GPCR信号通路),它的信号波动激发往往在瞬间完成, 并且胞浆钙离子浓度呈规律性变化,在肌肉收缩、细胞分泌、卵子授精、神经传导、个体发育、细胞凋亡等生理病理过程中,发挥关键的调控作用。

钙信号检测新平台LionheartFX

因此,即便在今天,搭载一套能够快速检测钙离子信号的成像设备也非常复杂和价值不菲。由于钙离子信号的瞬时反应特性,在成像检测时,需要在显微镜平台上搭载药物灌流系统以实现自动加样,另外为了保证活细胞培养条件,通常还需要加载精确地温度及气体控制系统,往往一套设备搭载下来如下图:

没错,这样的检测体系占用较大空间且极为复杂,给使用者和维护保养都带来了极大的不便。因此,在这里我们要介绍到的是一套新颖而功能强大的活细胞钙信号检测平台——LionheartFX活细胞成像系统。

独特的分液头设计 

怎么样?Lionheart FX不仅拥有高颜值,还有小巧苗条的身材。它带有的独立气体控制装置能够精确控制培养仓内的气体浓度,最重要的是,在LionheartFX上能够轻松搭配1-2个自动进样器,在活细胞监测过程中实现自动加样。为了能够更精细地测量细胞内钙信号的波动,BioTek还为自动进样器精心设计了独特的“原位分液头”。

使用这枚“原位分液头”,能够实现细胞样品固定区域分液后立即成像,非常适合快速生物学分析,例如钙离子成像。

卓越的图像信噪比优化 

通常使用特定的荧光染料检测钙离子,例如荧光增强特性的Fluo-4AM等,但是在这种方法进行钙离子成像时,由于荧光染料的标记方法或细胞种类限制等,往往导致图像背景过高,限制了成像检测的灵敏度,而LionheatFX配套的Gen5图像处理软件则带有优秀的图像信噪比处理功能,能够有效提高钙离子检测的灵敏度。

从图中可以看出,左边的原始图像背景非常高,而使用Gen5软件的背景优化程序后,能够显著降低图像背景,这一步骤非常关键,此后才能实现更精确的钙离子强度定量检测。

精确的图像定量分析 

通过Gen5软件强大的图像分析功能,能够对培养体系内的群体细胞及单个细胞分别进行定量,根据细胞类型的不同,可以得到一定时间范围内钙离子信号强度的波动变化。如下图所示:

此图反映的是通过两种分析方式得到的群体细胞内钙离子强度在ATP加入后逐渐增加的情况。而下图则使用了Gen5软件的特定细胞区域分析功能,精确评价了两个细胞个体内的钙离子强度信号波动情况。

所以,如果您也在探索细胞内这些钙离子们的前世今生,却苦于没有合适的仪器设备,不妨来看看LionheartFX吧~ 从加样、连续检测到数据分析,一站搞定哦!

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