Nature医学惊人发现：检测潜伏HIV，现有方法都不顶用？

　　

生物通报道：艾滋病在世界范围内广泛传播，严重威胁着人类健康和社会发展，一直受到人们的高度重视。近十年来HIV的治疗和预防已经取得了巨大的进步，HIV携带者的寿命大大延长，新HIV感染者已经从2002年的三百三十万减少到了2012年的两百三十万。但人们仍未找到治愈这种疾病的有效途径，也没有开发出相应的疫苗。

Johns Hopkins大学的科学家们对HIV患者体内潜伏的“原病毒”进行了全基因组测序。他们在八月八日的Nature Medicine杂志上发表文章指出，针对休眠HIV的现有评估方法都不准确。这些方法检测的多半是无危害的缺陷病毒，而不是能够恢复活性的功能性病毒。

这项研究显示，在人体内潜伏的HIV原病毒90%以上其实是“哑弹”，存在严重突变而且丧失功能。“治愈HIV你需要去除无缺陷的原病毒，”文章资深作者Robert Siliciano说。“但我们发现，标准分析法检测的病毒大多与治疗策略无关。”

目前的HIV疗法主要是使用一组抗逆转录病毒药物（ART）。虽然抗逆转录病毒药物能有效抑制HIV复制，但却无法将HIV-1清除出受到感染的细胞。这些病毒潜伏在特定免疫细胞中，不受ART治疗的影响。如果ART治疗中断，HIV就会重新复制并发展成艾滋病。清空HIV病毒库已经成为病毒学家们追逐的圣杯。

在测试针对原病毒的药物时，研究者们需要在治疗前后检测原病毒库的水平。他们大多通过PCR来定量特定的HIV基因，但PCR会算上那些缺陷性的原病毒，只要它们含有相应的基因。然而迄今为止，研究者们并没有意识到这个问题。

大家普遍认为感染初期的原病毒都是有功能的，在ART治疗初期PCR检测的也是有复活能力的原病毒。随着ART治疗时间的延长，越来越多的潜伏病毒开始出现缺陷。于是研究者们用一种比较麻烦的方法来检测无缺陷的原病毒，即QVOA（quantitative viral outgrowth assay）。

那么，这两种技术是否能够准确计数会惹麻烦的HIV原病毒呢？研究人员招募了年龄在20至76之间的19名HIV患者，对他们体内的大量原病毒进行全基因组测序。有些患者在感染一百天内开始ART治疗，另一些患者在感染180天后才开始ART治疗。

研究人员惊讶的发现，这些患者体内的大多数原病毒（90-98%）有缺陷，无法再恢复活性。在较晚开始HIV治疗的人中，PCR将HIV病毒库的真实大小高估了188倍，QVOA将病毒库低估了27倍。在较早开始治疗的患者中，PCR将病毒库高估了13倍，QVOA将病毒库低估了25倍。

虽然全基因组测序在研究中很有帮助，但这种方法耗时长、成本高，在临床上并不实用。研究人员表示，现在迫切需要开发检测HIV原病毒的新途径。因为准确计数原病毒是评估药物有效性的关键。

抗体是免疫系统生成Y形分子，能够有效靶标病原体。天然抗体的双臂结合同样的蛋白，而双特异性抗体的双臂靶向不同的目标。为了更好的打击潜伏HIV，研究人员设计了同时靶标白细胞表面受体（CD3）和HIV蛋白的双特异性抗体。这种抗体不仅能够逆转HIV的潜伏性，还承担着清除被感染细胞的任务。相关论文分别发表在Nature Communications和The Journal of Clinical Investigation杂志上。（更多详细信息参见：艾滋病研究新突破：摧毁HIV的藏身地）

HIV病毒有两种传播途径，一是直接感染宿主免疫细胞，二是通过已感染细胞在细胞间传播。Gladstone研究所的科学家们在Cell Reports杂志上发表文章指出，杀死T细胞并引发艾滋病的并不是HIV病毒，而是我们自己的免疫细胞。HIV病毒对宿主免疫细胞的直接作用并不那么可怕，真正致命的是已感染细胞对其它细胞的影响。这项研究表明，细胞-细胞传播比游离病毒直接感染有效100-1000倍。而且只有细胞-细胞传播才能启动连锁反应，最终使新感染的细胞自杀。（更多详细信息参见：Cell子刊颠覆性发现：引起艾滋病的不是HIV？）

HIV被动免疫疗法是一种还未用于临床的新策略，是指定期使用广谱中和性HIV抗体（bNAb）来控制患者体内潜伏的HIV病毒。美国NIH国立过敏与传染病研究所的科学家们在美国国家科学院院刊PNAS杂志上发表文章，进一步强调了HIV被动免疫疗法的重要性。他们的研究表明，在停止抗病毒治疗之后，被动免疫疗法可以继续抑制HIV病毒。（更多详细信息参见：PNAS：被动免疫疗法有望结束HIV的潜伏）

生物通编辑：叶予

生物通推荐原文：Defective proviruses rapidly accumulate during acute HIV-1 infection. Nature Medicine