细胞转染与分子载体新技术与产品

【字体: 时间:2014年10月23日 来源:生物通

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  当需要将外源分子(质粒DNA或者小分子 siRNA)加载到细胞中时,细胞生物学家各有各的高招,其中最受欢迎的就是目前常用的化学转染试剂,也就是利用脂类或聚合物携带分子,通过仪器设备电击细胞,使其细胞膜瞬间产生孔道,这样这些载体就能进入细胞了。

  生物通报道:当需要将外源分子(质粒DNA或者小分子 siRNA)加载到细胞中时,细胞生物学家各有各的高招,其中最受欢迎的就是目前常用的化学转染试剂,也就是利用脂类或聚合物携带分子,通过仪器设备电击细胞,使其细胞膜瞬间产生孔道,这样这些载体就能进入细胞了。此外还有病毒载体系统。

选择哪种细胞转染方法通常需要综合多方面的考虑因素,比如靶向的细胞类型,传递的分子种类,以及转染效率哪家强等等诸如此类的问题。

来自美国转染试剂公司Mirus Bio的技术服务总监Josh Snow认为,“最吸引人的方法就是最简单的方法,即化学转染方法”。

大体来说,传统的化学和物理转染方法就能满足大部分研究人员的需要,因为一般的科研采用的都是易于转染和培养的细胞系。但是这些方法常常是有毒的,而且当面对原代细胞、干细胞或其他难转染的细胞类型的时候,化学方法的转染效率就较低了。相对来说病毒载体方法对范围较广的细胞类型,转染效率就相当高了,不过这种方法又存在耗时耗力,操作人员需要特殊准备措施的问题。

当然方法总是比问题多,目前一些转染产品公司已经开始研发更高效率的转染方法和易于操作的细胞。比如说,今年一月,Life Technologies 就推出了一种新产品:Lipofectamine 3000,这是一种针对“难以转染细胞,以及原代细胞”的产品,在保证转染效率的同时也提高了细胞存活率(Lipofectamine 3000 可申请试用装)。

还有Mirus Bio公司也研发出了一种转染试剂,适用于特别难以转染的细胞类型,如皮肤细胞、神经细胞、乳腺癌细胞,以及血细胞。

更令人关注的是一些科学家们也创新性的发现全新的细胞转染方法,这种方法不仅能用于核酸分子,而且也可以携带譬如小分子和蛋白的新材料类型。

Lonza Nucleofector核转染技术

Lonza Nucleofector™核转染技术首先攻克了免疫/血液相关细胞用脂质体转染法、普通电穿孔转染法转染无效以及病毒转染方法耗时、存在安全隐患、细胞免疫反应等的技术难关,其对原代免疫/血液细胞以及难转染的免疫学相关细胞系都有极高的转染效率和细胞成活率。

Lonza Nucleofector™核转染技术作为第一个成功高效转染原代血细胞的非病毒转染方法,目前其针对免疫细胞的转染方案是最全面和成熟的,已经成为免疫/血液细胞转染的金标准,被广泛用于免疫/血液学研究中,已发表免疫/血液学相关文献近2000篇。(索取更多资料

Lonza为癌症研究和药物研发提供完整工具包

Lonza Nucleofector™技术在糖尿病研究中的应用

Lonza Nucleofector® Technology在神经生物学中的应用


昆虫细胞系专用转染试剂

常见体外重组表达系统分为原核表达系统和真核表达系统,原核表达系统主要为大肠杆菌表达,操作简便、周期短收益大及表达产物稳定,但是表达基因的相对分子质量有限,不宜过大,且缺乏翻译后加工、修饰等元件。真核细胞系统包括 CHO等哺乳动物细胞、酵母细胞和昆虫细胞等。昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)具有高效表达,完善的转译后加工修饰,较易从无血清培养上清中纯化的蛋白,无内毒素污染等特点,日益受到人们的重视,逐渐应用到更多的领域中。

虽然昆虫表达系统具有高效表达的特性,但是在转染过程中转染效率也是一个重要影响因素,目前市场上大部分的转染试剂对于昆虫细胞系而言,转染效率均不太理想,转染效率低下,细胞毒性大是普遍存在的问题。美国转染试剂专家Mirus的研发团队经过精心研制,推出昆虫细胞系专用转染试剂TransIT®-Insect,该转染试剂适用于绝大多数昆虫细胞系的高效转染。 (更多技术资料索取

罗氏以1.25亿美元收购RNAi和基因治疗公司Mirus


ViaFect

ViaFect™ 转染试剂是Promega全新推出的转染试剂,采用创新型混合脂质配方,可用于DNA转染,高效低毒。无需去除血清,导入转染试剂:DNA复合物后,无需洗涤或更换培养基, 是目的基因在细胞中表达实验的推荐选择。 

它不仅在我们常用的贴壁细胞上表现良好,也适用于通常认为难以转染的细胞,如悬浮细胞和干细胞。研究证实,ViaFect转染试剂能够可靠转染iPS来源的细胞,如Cellular Dynamics的iCell® 心肌细胞,实现其他试剂所不能的分析。(欢迎索取ViaFect转染试剂的详细资料

Promega转染试剂新鲜上市 免费试用

干细胞转染工具之大集合

原文摘选:

Entry Requirements
Recent developments in cell transfection and molecular delivery technologies

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