创新参选：酯酶同工酶染色方法优化

通过对酯酶同工酶染色试剂的选择，染色时间，pH值，温度，药品用量等条件的优化，使酯酶同工酶染色效果更清晰，条带整齐。在进行动植物种类同工酶鉴定的应用中有着深远的意义。（由吉林农业大学生命科学院供稿）

　　

“赛默飞之生物通2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。
生物通将会陆续公布一些项目，以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者，生物通也准备了一些精美礼品寄出，同时近期我们还将进行第二轮抽奖，以飨读者。

参选项目：酯酶同工酶染色方法优化

背景：酯酶同工酶标记在灵芝属菌种鉴定中的应用中文摘要灵芝是我国重要的传统中药材,其传统分类鉴定主要依据形态指标。但是灵芝的形态特征易受到光线，基质营养状况等环境因素的影响而发生改变，从而造成了分类与命名不准确，出现同名异种及同种异名的混乱现象，不能客观地反映株间及各分类单元之间的遗传差异性。

本试验对不同来源的8种32株灵芝菌株进行了醋酶同工酶分析，以期揭示菌株间的遗传差异性，为灵芝的系统分类和育种奠定基础。结果如下： 1.EST 同工酶从酶带数及酶活性上看，在亚科间、属间、种间差异都很明显，因而可以作为不同亚科间、属内不同种间、不同属不同种间的分类指标。 2.通过对32个菌株的酯酶同工酶酶谱研究及聚类分析，在相异系数为0.59时所有供试菌株归为一个群。在相异系数为0.86时，把8种菌株分为4个群。日本赤芝与长白山野生赤芝归为一个类群，说明它们之间有着极大的相似性，是一种同种异名的现象。同样存在同种异名现象的还有赤芝001与泰国灵芝，赤芝与黄芝。其次，在相异系数为0.8时，长白山野生赤芝、日本赤芝、日本灵芝可以归为一个大群，说明三者亲缘关系很近，红芝与其他7种灵芝都不归为一类，说明其亲缘关系相对较远。 

方法改进： 通过对酯酶同工酶染色试剂的选择，染色时间，pH值，温度，药品用量等条件的优化，使酯酶同工酶染色效果更清晰，条带整齐。在进行动植物种类同工酶鉴定的应用中有着深远的意义。

结果：通过对酯酶同工酶染色试剂的选择，染色时间，pH值，温度，药品用量等条件的优化，使酯酶同工酶染色效果更清晰，条带整齐。在进行动植物种类同工酶鉴定的应用中有着深远的意义。

 

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