陈凌研究组J Virol发表突破性研究成果

　　

生物通报道：来自中科院广州生物医药与健康研究院，中国科技大学等处的研究人员首次报告成功研制了稳定携带报告基因的复制型甲型流感病毒。这一突破性研究成果不但为流感病毒的基础研究，也为流感疫苗、抗流感病毒药物和抗体的研发提供了强有力的工具，相关报道公布在著名国际病毒学期刊Journal of Virology（84:12075）上。

领导这一研究的是广州生物医药与健康研究院呼吸疾病国家重点实验室陈凌博士，其早年毕业于上海医科大学，主要研究领域涉及生物医药领域的前沿领域，包括癌症、艾滋病及其他病毒类疾病的发病机制和疫苗研究等。

近年来，流感病毒的流行以及快速变异对人类健康提出了严峻的挑战，因此流感病毒的致病机理亟待进一步阐明，人类也迫切需要更为安全有效的新型流感疫苗及抗流感药物。

在这篇文章中，研究人员通过对实验室用非致病株PR8流感病毒基因组NA片段进行改造，整合入增强型绿色荧光蛋白报告基因（EGFP），同时保留了完整的流感病毒基因组的复制型甲型流感病毒，克服了之前其他的报道均是复制缺陷型流感病毒所存在的问题。携带报告基因的复制型甲型流感病毒可以在细胞以及鸡胚中稳定生长、传代并表达报告基因，因此可以很好的的模拟野生型病毒；同时，报告基因的检测便捷可靠，可用于筛选与评价抗流感病毒药物和抗体。

更有意义的是，检测报告基因的表达情况可以用来实时追踪流感病毒在动物模型体内的感染、生长与分布。因此，该成果不但为流感病毒的基础研究，也为流感疫苗、抗流感病毒药物和抗体的研发提供了强有力的工具。

近期除了这一研究成果外，甲型流感研究也获得了重要突破——研究人员发现若甲型H1N1流感患者体内病毒量高，可导致免疫系统失调和严重炎症，是病情恶化的主因；利用甲型H1N1流感康复者血浆能有效治疗严重病例。

研究人员在2009年5月至去年1月期间，对74名因感染甲型H1N1流感而需要入院治理的亚裔患者进行研究，其中38人病情严重，其余36人病况则较轻微。

研究结果发现，严重患者体内出现持续高病毒量和免疫系统不协调的情况，继而产生严重炎症和体内一种免疫蛋白异常下降，使患者失去对抗其他细菌感染的能力，导致病情加剧。此外，严重患者大多在发病后5天才入院接受治疗，错过了使用抗病毒药物的黄金48小时。

（生物通：万纹）

原文摘要：

Generation of Replication-Competent Recombinant Influenza A Viruses Carrying a Reporter Gene Harbored in the Neuraminidase Segment

Replication-competent influenza viruses carrying reporter genes are of great use for basic research, screening of antiviral drugs, and neutralizing of antibodies. In this study, two recombinant influenza A viruses with a neuraminidase (NA) segment harboring enhanced green fluorescent protein (EGFP) in the background of A/PR/8/34 (PR8) were generated. The viral RNA (vRNA)-specific packaging signals for NA were largely retained for efficient packaging. An "autocleave" 2A peptide sequence, which was inserted at the N terminus or the COOH terminus of NA to link with EGFP, enabled NA and EGFP to be expressed monocistronically. Further analysis demonstrated that both viruses, named rPR8-EGFP+NA and rPR8-NA+EGPF, although with some characteristic differences in growth and EGFP expression, could replicate in noncomplementary cells and propagate to large quantities while maintaining genome stability after multiple passages in embryonated eggs. These replication-competent influenza viruses carrying reporter genes are a great addition to the tool set for developing antiviral therapeutics and vaccines and for in vivo studies of viral dissemination and pathogenicity.

作者简介：

陈凌博士，原籍福建晋江，中国科学院广州生物医药与健康研究院首任院长、研究员。中国科技大学医药生物技术系系主任，教授。2006年国家杰出青年科学基金(外籍)获得者。1984年毕业于上海医科大学，考取留美生物化学与分子生物学(CUSBEA)项目赴美留学。1991年获美国印第安那大学生化与分子生物博士学位。1992—1994年在美国哈佛大学医学院从事博士后研究。先后在哈佛大学医学院、美国Dana—Farber癌症研究所、Merck、Lexicon Genetics从事研究。

研究工作涉及生物医药领域的前沿领域，包括癌症、艾滋病及其他病毒类疾病的发病机制和疫苗研究，研究成果发表于Na—ture，Journal of Clinical Investigation，Cancer Research，Journal of Virology，Vaccine等国际学术刊物，并有十多项国际发明专利。是默克研究实验室艾滋病疫苗的主要发明人，该疫苗被视为最有望成功的艾滋病疫苗并进人人体试验阶段。2004年4月回国筹建中国科学院广州生物医药与健康研究院。目前已发展为一支有200多名科研人员，100多名研究生，具有6大研究中心，20个研究室的国家级科技队伍。