09创新产品点评：Cell ID™系统

　　

生物通报道：生物通2009年度生命科学十大创新产品评选已落下帏幕，与去年创新产品评选相比，今年的评选甫一开始，就受到了各方面的关注，候选产品几乎是去年的2倍，收到的投票数更是高达37319。经过两个半月的读者投票和专家评鉴，2009生命科学十大创新产品终于出炉了。

2.Cell ID™ System & StemElite™ ID System
——STR分析被公认为首选的快速鉴别细胞系的技术

由于细胞培养体系在生物药物的研究和技术发展中非常重要，适当的细胞系鉴定过程即成为每个研究人员的最大兴趣点。然而交叉污染的问题仍然存在。细胞系被错误辨识不仅会浪费时间和金钱、导致结果前后不一或不可重复、或文献被退回，还可能对人类健康产生潜在的威胁。

在细胞培养中可以使用许多方法对交叉污染进行鉴定，如同功酶分析、染色体组分型、人淋巴细胞抗原（HLA）分型和扩增片段长度多态性（AFLP）的特征分析。但是，比较好的方法是STR图谱法，此方法是在以DNA为基础的法医鉴定领域成功建立起来的。在ATCC，STR分析使用的是多重PCR（Promega PowerPlex®1.2系统），可以同时扩增8个STR位点加1个性别决定位点Amelogenin。每个被分析的人源细胞系都有其独特的DNA重复模式，因此通过与基础图谱进行比对，即可对每一批新细胞系的身份进行确证。

Promega公司是STR分型系统的主要供应商，在法医和亲子鉴定方面具有领先优势，其PowerPlex®1.2 STR分析系统（PowerPlex® 1.2 STR analysis system）已经成为细胞培养机构进行细胞系鉴定的“金标准”。为了满足使用更简便地进行细胞系鉴定的需要，Promega研发了Cell ID™系统（Cell ID™ System），并对此系统进行了改进，提供了能够成功而简便地鉴定、鉴别人源细胞系和检测种系内细胞系交叉污染的试剂。

Cell ID™系统使用STR分型技术，同时扩增特异性强、具有高度多态性的10个位点（9个STR位点和性别识别位点Amelogenin；包括D21S11，TH01，TPOX，vWA，Amelogenin，CSF1PO，D16S539，D7S820，D13S317和D5S818），三色荧光标记。这些位点组合所提供的遗传图谱的随机匹配概率为29.2亿分之一。该系统包括一个热启动的Taq DNA聚合酶，可以方便地在室温条件下组装反应组分。 扩增后，采用单次注射毛细管电泳对样本进行分析，同时结合使用所提供的标准品，用以帮助确定不同位点的等位基因的大小。使用等位基因分析软件确定遗传图谱。

凭借这些方面的突出优势，Cell ID™系统在此次的生物通2009年度生命科学十大创新产品评选中脱颖而出，被专业读者评为“2009年度生命科学十大创新产品”，为了更深入了解这一产品，生物通就读者感兴趣的一些问题采访了Promega的付艳荣女士。

生物通：细胞培养体系在生物药物的研究和技术发展中非常重要，随着世界范围内实验室使用新细胞系的数量增多和频率增加，造成交叉污染问题也越来越严重，贵司推出的Cell ID™系统是解决这下一页一问题的一个“良方”，我们知道在这一系统推出之前，贵司也有其它相似的产品，那么Cell ID™系统与之前的产品相比，有何改进之处呢？

Promega：是的，目前细胞系的交叉污染或被错误鉴定的问题越来越严重，据估计，研究时所使用的细胞系的实际特征与该细胞系的原本特征不相符合的现象高达36%。就在今年1月14日，Journal of the National Cancer Institute (JNCI)在线版登出了荷兰科学家们的惊人发现：目前广泛使用的13中食管癌细胞系中有3种已经被其它癌细胞系污染、或被错误鉴定！而实际情况是：基于其中的2种细胞系得出的实验结果已经被用于食管癌的临床研究，发表的文献高达100多篇，获得了11项美国专利，受国立健康研究院（NIH）资助的项目至少3个。因此，在科研实践中大力推行细胞系鉴定是势在必行的。

在Cell IDTM系统出现之前，Promega公司在基于短串联重复序列分析技术上具有独到的优势，开发出了多种试剂系统，同时扩增人基因组中多个特异性基因座，以此来进行DNA分型鉴定。近年来，其PowerPlex® 1.2系统已经被多家细胞库视为“金标准”，用于确认细胞系是否变异。这些细胞库包括：美国的ATCC（American Type Culture Collection）和NSCB（National Stem Cell Bank）、日本的JCRB（Japan Collection of Research Bioresources）。

Cell IDTM的改进之处：相比于PowerPlex® 1.2系统，Cell IDTM系统增加了一个基因座，即在Cell IDTM系统中，同时扩增10个基因座（9个STR基因座和1个性别基因座），这些位点的组合所提供的细胞系遗传特征的符合概率为29.2亿分之一。同时，该系统还提供性能强劲的热启动酶，以确保10对引物被精确地同时扩增。

生物通：Cell ID™ System & StemElite™ ID System被读者评为2009年生命科学十大创新产品之一，这也从一个方面反映了读者对这一产品的肯定，您能谈一下这一产品的创新点吗？

Promega：这类产品最大的创新点就是通过短串联重复序列进行DNA分型，从而实现细胞系的遗传特征鉴别。值得一提的是：StemElite™ ID 系统还引入了鼠源DNA的特异基因座，用于方便地鉴别人源干细胞培养体系中是否混有做为哺育细胞的小鼠细胞。

生物通：很多读者十分希望能通过Cell ID™系统帮助他们解决交叉污染的问题，但是他们不清楚Cell ID™系统具体有哪几种产品，能分辩哪几种细胞系？

Promega：目前有2种产品，分别为Cell ID™系统和StemElite™ ID系统。Cell ID™系统用于鉴定人源细胞系，例如，鉴定受试细胞系在经过多次传代后，是否仍保持着其原始细胞系的遗传特征。StemElite™ ID系统用于鉴定人源干细胞培养体系中是否混有小鼠细胞。二者适用于所有的人源细胞系。