Revolution®：让我们看得更清楚

　　

生物通报道：随着现代细胞生物学的飞速发展，科学家们越来越希望了解活体细胞内部的活动，因此各种活细胞成像技术也随之步入了快速发展期。

这一领域尽管近年来在活体成像，动态观察方面获得了长足的进展，但是活细胞成像系统仍然有很大的发展空间，研究人员认为活细胞成像系统的真正核心是使研究人员理解细胞中的分化“决定”过程，同时在实时条件下观察这一过程，根据动态过程发生的速度，可能需要一些研究方法，例如快速的图像捕捉和更慢的慢速拍摄。

由北爱尔兰Andor Technology公司（这是一家以低光成像和显微系统著称的领先公司）推出的Revolution®活细胞激光共聚焦显微镜是活细胞动态分析方面的一种重要设备，这种活细胞激光共聚焦显微镜是基于Andor著名的iXon系列单光子探测器，结合Yokogawa独有专利技术的Nipkow双转盘激光共聚焦扫描单元CSU-X1, 因此能达到每秒钟2,000幅共聚焦图像的帧速。可用于研究细胞中单分子的动态特性、动态矢量，实现对样品的精确至单像素光学操作的超快成像。

iXon单光子探测器(EMCCD)灵敏度高，实现了用强度极低的激发光照射样品，一次曝光获取高信噪比、高时间分辨率的2D共聚焦图像。更低的激发光强，更短的曝光时间，产生的光毒性和光漂白作用就轻，细胞没有受到损伤，就能实现更长时间的成像实验。并且结合全内反射荧光（TIRF）技术，Revolution®共享一套激光光源，集成TIRF照明装置，实现细胞膜（100-200nm TIRF成像）至细胞内（Confocal）全动态运动目标追踪成像。

生物单分子研究是指在单分子水平上对生物分子行为（包括构象变化、相互识别、相互作用等）的实时动态检测以及在此基础上的操纵和调控等，这种TIRF技术利用全内反射产生的隐失场来照明样品，在百纳米级厚的光学薄层内的荧光团受到激发，荧光成像的信噪比很高，依靠单光子探测器用来观察单分子成像，及观测发生在细胞膜上的生理反应。因此可用于实时观察单个肌浆球蛋白分子的运动、单个蛋白分子对之间的荧光共振能量转移(FRET)、ATP酶的翻转、聚合物内单个分子的结构变化、等离子体膜附近的神经分泌腺的颗粒运动、胞内吞和胞吐等现象。

另外值得称道的一个方面就是Revolution®能长时间进行活细胞观察时不能出现离焦现象，不少显微镜都存在调焦机构热漂移的问题，而Revolution®配置的Z轴零漂移检测系统，采用近红外激光监测载片底部，保持显微镜焦面位置稳定。

Andor Technology公司建于1989年，全世界有200多个员工，分布于世界15个办公点，产品遍及55个国家。在科学成像、光谱学解决方案方面处于世界领先地位。

（生物通：万纹）