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甲基化分析的必备工具—Cells-to-CpG亚硫酸氢盐转化试剂盒[新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2010年11月01日 来源:生物通
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亚硫酸氢盐转化用于DNA甲基化研究已有20年之久,但迄今为止改进甚少。Life Technologies经过彻底的优化,推出了Cells-to-CpG™ 亚硫酸氢盐转化试剂盒。它为亚硫酸氢盐转化提供了一种快速简化的方法,能够在位点特异或全基因组分析中揭示出甲基化的胞嘧啶。
对癌症、基因表达、遗传病以及生物学其他很多重要的方面来说,高效准确地定量并检测DNA甲基化的能力正变得日益重要。亚硫酸氢盐的方法是鉴定DNA样品中特定甲基化模式的最常用技术。它包括用亚硫酸氢盐处理DNA,将未甲基化的胞嘧啶转化成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变(图1)。
图1. 胞嘧啶转化原理。
亚硫酸氢盐转化用于DNA甲基化研究已有20年之久,但迄今为止改进甚少。Life Technologies经过彻底的优化,推出了Cells-to-CpG™ 亚硫酸氢盐转化试剂盒。它为亚硫酸氢盐转化提供了一种快速简化的方法(图2),能够在位点特异或全基因组分析中揭示出甲基化的胞嘧啶。
从细胞、组织、血液、FFPE样品或纯的DNA开始,直接裂解并变性样品,用于后续的亚硫酸氢盐转化、脱盐和脱磺。操作过程不到3个小时,与其他至少需要18个小时的现有方法相比时间明显缩短。
图2. Cells-to-CpG™ 亚硫酸氢盐转化试剂盒的简化流程。
Cells-to-CpG™ 系统包含了从直接样品转化到纯化所需的全部组分,提供了一个经过验证、灵活简化的亚硫酸氢盐转化方案,适合实时定量PCR、毛细管电泳和新一代测序的流程。试剂盒有两种规格:50次反应和2×96孔板,供你灵活选择。
Cells-to-CpG™ 亚硫酸氢盐转化试剂盒旨在提供数量上可靠的结果,此结果经过现有对照的验证。转化后的DNA回收与起始量线性关联,在未甲基化和甲基化的样品之间未观察到偏向性(图3)。
图3. 利用Cells-to-CpG™ 亚硫酸氢盐试剂盒转化后,起始DNA的定量回收。(A) 从起始量为100 ng-2 μg的Hela gDNA和Methyl HeLa gDNA对照开始,PCR结果表明转化后的线性产量。(B) 对于所有起始量的甲基化和未甲基化DNA,熔解曲线都是相同的,这意味着转化反应无偏向性。gDNA = 基因组DNA。
Cells-to-CpG™ 方案提供了:
• 经过验证的方案,适合Life Technologies平台,将优化的需求降至最低
• 从多种起始样品类型开始的能力,包括细胞、组织、血液和FFPE样品
• 减少的时间和人力,直接转化样品中的胞嘧啶,而无需纯化基因组DNA
• 更大的实验灵活性,试剂盒适合您的通量——单管和96孔形式
• 对结果的信心,其中的对照能轻松监控转化率