应对毒食品事件：快速检测技术

　　生物通报道：自三聚氰胺事件之后，近期国内又接连发生了受污染爱尔兰猪肉，以及香港禽流感事件，应对这些突发事件不仅需要国家相关部分的严格监管，也需要高效快速的技术配合。

快速检测方法需要符合几项要求：可现场检测，实验准备简化，使用的试剂较少，配制好的试剂保存期长，样品前处理简单，对操作人员要求低，另外最终分析方法直观、准确和快速。

目前已有了一些较成熟的检测方法，比如化学比色分析法，酶联免疫法（就是我们熟悉的Elisa），免疫胶体金试纸等等，并且随着检测设备的发展，也出现了食品安全检测箱，检测车，以及一些近年出现的技术，比如生物芯片，色谱质谱检测仪等。

化学比色分析法与一般的仪器分析方法相比，具有价格低，操作相对简便，结果显示直观，一次性使用，不需检修维护，有一定的灵敏度和专一性等优点。目前常用的化学比色法包括各种检测试剂和试纸，两者都是利用迅速产生明显颜色的化学反应检测待测物质，可通过与标准比色卡比较进行目视定性或半定量分析。

不过目视有时也会出现部分偏差，因此比较准确的是利用一些仪器来辅助分析，比如默克的RQ反射仪，这种反射仪采用独特的反射光测试原理进行测试，入射光被带颜色的测试条吸收；通过测量被吸收的光的强度，被分析物的浓度被计算出来。并且这种仪器携带方便，操作简单——只需要插入试纸条，按下按钮就可以得到可靠的结果了，因此用于现场分析是再适合不过了。

Elisa方法则是一种以酶作为标记物的免疫分析方法，也是目前应用最广泛的免疫分析方法之一 。将酶标记在抗体 /抗原分子上形成酶标抗体 /酶标抗原，酶作用于能呈现出颜色的底物，通过仪器或肉眼就可以进行辨别了。ELISA方法常用的固相载体是96孔聚苯乙烯酶标板，常用的酶是辣根过氧化物酶，常用的底物是邻苯二胺和四甲基联苯胺等。

此类产品在此次三聚氰胺事件中发挥了不小的作用，比如Beacon Analytical Systems公司的Beacon Melamine Plate Kit、Abraxis公司的Melamine Plate kit、Strategic Diagnostics公司的EnviroGard Triazine Plate kit等，国产的就有中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所开发的检测三聚氰胺的酶联免疫试剂盒等。

运用Elisa方法要选择好的酶标仪，考虑的参数包括波长范围（Wavelength range），光度测定范围（photometric range），线性度（linearity），精确度（accuracy）和阅读时间（Read time）等等，现下销售的火热的酶标仪不少，其中三款比较适合快速检测分析：BioTek的ELx800酶标仪，赛默飞世尔的MK3酶标仪，以及Bio-Rad的680型酶标仪。

生物芯片技术是一种运用十分广泛的技术，由于其高通量，高灵敏度等特点，也成为了一种快速检测不可或缺的方法。除了常用的免疫芯片，基因芯片外，Luminex公司推出了一种液相悬浮芯片。这种多功能悬浮点阵或称为液体芯片的产品有机地整合了有色微球、激光技术、最新的高速数字信号处理和计算机技术，集中了分子生物学、免疫学、高分子化学、激光物理学、微流体学、计算机科学等多门学科，使之具有了前所未有的检测特异性和灵敏度，这一系统可以在一个25－50μL的样品内同时检测多达100种以上不同的检测项目，具有重复性与稳定性好、高通量、检测指标可灵活选择以及高灵敏度与高信噪比等诸多优点。

这种芯片的技术原理并非等同于传统意义上的固相生物芯片。这一系统的检测载体为2种被染上不同荧光染料、各 10种不同浓度梯度的聚苯乙烯微球 (直径为516μm) ，即每种检测微球上被定义上一个唯一的编码地址。理论上，不同荧光微球上包被不同的探针分子。国外已开始将 Luminex悬浮芯片技术应用于多种病原微生物和毒素的快速检测研究，并取得了重要的研究进展。

最后还要提一下色谱质谱方法，色谱质谱方法可以较快速地检测到极低的污染，并能分析污染物质的化学成分，而且与仪器相配套的笔记本电脑里还储存有2000种有害化合物的分析材料，可以针对检测的物质立即从电脑里调出相关的资料进行分析，选取处理方法。

目前商业质谱仪主要来自赛默飞世尔公司，美国应用生物系统公司(ABI)、安捷伦科技公司(Agilent)、布鲁克·道尔顿公司(Bruker Daltonics)，以及沃特斯公司(Waters)等。比如此次三聚氰胺事件，美国FDA检测三聚氰胺用的就是赛默飞世尔的TSQ Quantum Ultra系统，目前赛默飞世尔还将独有的在线样品前处理技术TurboFlow 色谱净化和TSQ Quantum LC/MS/MS 分析结合，使分析流程得到大大简化和操作自动化。TurboFlow 是一种可以除去复杂样品中蛋白质等大分子成份的在线样品净化方法，因而不需要传统的蛋白沉淀、液液萃取和SPE 等步骤，有效缩短了样品预处理的时间，因此大大提高了分析速度，同时提高了数据的可靠性，检出限低至10ppb ，而且降低了分析成本。

另外Waters公司也发布了快速检测婴儿奶粉和液体奶中三聚氰胺的方法，这一新方法使用了液相色谱串联四级质谱仪器Waters ACQUITY TQD，以及应用了IntelliStart技术的Waters MassLynx 4.1软件用于数据收集和质谱参数优化。

快速检测方法具有操作简单、快速的优点，在食品检测方面发挥了越来越多的作用，虽然还存在食品样品前处理、操作规范性等方面，不过相信随着未来的技术进步，这一技术将得到更多的发展。

（生物通：张迪）