实时观测DNA修复的新思路

【字体: 时间:2006年09月25日 来源:生物通

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  生物通报道:加州州立大学研究人员设计出一种新方法,能够实时观测DNA的组装过程。研究详细结果刊登在9月20日电子版《Nature》杂志上。

  

生物通报道:直接观测DNA有助于更好地研究遗传物质的复制和修复情况。

文章第一作者、加州州立大学(University of California)博士后学者 Roberto Galletto 说:“我们可以直接对复制和修复过程进行监控,获得新的发现。” 研究详细结果刊登在9月20日电子版《Nature》杂志上。

大肠杆菌(E. coli bacteria)的RecA酶,能够延着长链DNA延伸,与DNA形成细丝状结构(filament)。一条完整的DNA延着RecA排列,其它DNA可以与母链的缺口部分进行交换,以填补缺口。在人体中的Rad51蛋白发挥相似功能,有研究显示Rad51与乳腺癌有关。

论文高级作者、加州大学分子和细胞生物学教授、遗传和发育实验室主任Stephen Kowalczykowski 说:“RecA和Rad51组装filament的过程决定了DNA修复效果,但目前对于组装的机制还知之甚少。”

Galletto将一小片段DNA附着在微小橡胶粒上,然后将小橡胶粒注入由激光“镊子”控制的流动小室(chamber),橡胶粒上的DNA能够“随波逐流”。Galletto用激光轻轻将这些像水草一样在液体中漂动的DNA推出小室,推到邻近的一个含有荧光标记RecA的通道里。短暂的停留后,再将DNA推回原先的小室。

对同一DNA重复上述浸占过程,结果每一DNA上附着了4-5个RecA。一旦这些RecA在DNA上成串排列,DNA/RecA形成的细丝会迅速向两端延伸。Kowalczykowski认为实验过程中使用的这种技术为将来研究RecA和Rad51提供了很好的参考。

实验中采用的方法是在Kowalczykowski 和分子细胞生物学家Ronald J. Baskin早期研究一种解链酶工作情况时使用的方法上发展起来的。当时的研究结果刊登于2001年Nature杂志上。

研究经费来源于Jeane B. Kempner颁发给Galletto的奖金和美国国立卫生研究院的资助。(生物通记者 子元)

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