精子蛋白质组学研究新突破

　　

生物通报道：现代蛋白质组学技术已经延伸到了人类精子中发现的蛋白质领域，这些方法将会有助于人们更好地了解生殖的基础方面并可能促进不育的治疗。

 

在人类身体中的所有不同类型细胞中，精子是一种非常特殊的细胞，它与独特的功能核形态特征。尽管大量的研究已经确定出了精子运动所需的特殊蛋白质（包括与卵的相互作用有关的蛋白、细胞核蛋白），但是许多功能蛋白仍然没有确定出来。

 

尽管已经有多项研究报道了对人类精子蛋白质的蛋白质组研究结果，但是意大利的研究人员发现了这些研究的一些缺点：这些研究的大多数都使用一维电泳方法，这种方法不利于蛋白质的分离。一项利用二维电泳的研究产生出一个蛋白质图谱，但却未能利用质谱仪来鉴定蛋白质。有另外一项研究则使用了HPLC（液相色谱）和质谱仪，但是鉴定出来的蛋白质却没有公布。

 

因此，Barcelona大学的Rafael Oliva和同事利用二维电泳方法来尝试确定出更广泛的人类精子蛋白质。他们将从11名健康男性获得的样本进行离心以去除污染细胞并制备出分析所需精子样品，最终利用溶解和等电子聚焦（IEF）技术获得蛋白质。之后利用SDS-PAGE作为第二维分析。

 

总共获得了1000多个点，并且其中145个被选择来进行胶内消化并利用MALDI质谱（matrix-assisted desorption/ionization mass spectrometry）进行鉴定。这些蛋白质的分子质量在10到70kDa之间。

 

通过将peptide mass fingerprinting与SwissProt和NCBI数据库进行比较，研究组确定出98个蛋白。这些蛋白属于不同的功能类别，其中大部分与能量生产、转录、蛋白质合成、蛋白质运输和折叠有关。

 

发现的第二类令研究人员非常吃惊，它们与RNA结合和转录有关。剩余的蛋白质与细胞周期、凋亡和氧化胁迫、细胞骨架和细胞运动有关。（生物通记者杨遥）