《自然》两篇文章解析RNAi技术的新方法

　　

生物通报道：RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术的发明无疑是生物技术领域的一大进步，已经被应用到科研和治疗等许多方面。本期（5月4日）Nature杂志一篇News and Views，一篇Letter分别描述了RNAi技术的新进展：来自美国国立卫生研究院（NIH）癌症研究中心的研究人员发现了一种新颖的筛选方法，可以用来识别影响癌细胞分裂的基因，而来自美国麻省Alnylam Pharmaceuticals Inc公司的研究人员则是治疗性入手，发现了将RNAi作为一种新药物治疗方法的重要进展。

Nature 441, 106-110 (4 May 2006) | doi:10.1038/nature04687
A loss-of-function RNA interference screen for molecular targets in cancer
[Abstract]

Nature 441, 111-114 (4 May 2006) | doi:10.1038/nature04688
RNAi-mediated gene silencing in non-human primates
[Abstract]

RNAi，即RNA干扰，是一种利用20多个核苷酸组成的短双链RNA（siRNA）代替传统反义核酸进行转录后基因沉默的方法。在2001年Nature杂志上首家报道在哺乳动物培养细胞中通过siRNA成功诱导了特异性靶基因表达沉默之后，RNA干扰技术就作为一项特异性基因沉默的有效工具从低等生物成功进军哺乳动物领域。现在已迅速而广泛地应用到基因功能，基因表达调控机制研究等热门领域，并为基因治疗开辟了新的途径。

Vu N. Ngo等人主要针对的是癌症研究，研究人员采用了一种新型的筛选方法：利用一个RNAi库对癌症细胞存活和增殖所需基因进行基因缺失筛选（loss-of-function screen），这种方法可以在筛选过程中把去除的RNAi分子分离出来，显示出不一定包含突变或其它改变的潜在的治疗目标。其中这个文库是通过脱氧羟四环霉素诱导逆转录病毒载体（doxycycline-inducible retroviral vector）表达shRNAs建立起来的文库。然后利用这个文库对低度B细胞淋巴瘤（B-cell lymphoma，DLBCL）中的2500个靶基因进行筛选，结果发现了对于某一DLBCL亚型的癌细胞存活和增殖至关重要的3个基因，尤其是CARD11蛋白因子基因——CARD11（caspase recruitment domain 11，胱冬肽酶募集结构域）属于膜相关的鸟苷酸激酶(membrane-associated guanylate kinase，MAGUK)家族的一个成员，分子结构含有CARD、PDZ、SH3、GUK结构域。这说明了CARD11有可能是未来的一种重要癌症治疗靶目标。

另外一篇文章中，Tracy S. Zimmermann等人则是在非人类灵长目动物（猕猴）里发现前所未有的siRNA对一种致病基因的沉默作用。虽然目前有许多的实验例证了体内利用siRNA原位传递（local delivery）可以沉默靶基因，但是很少有有关RNAi介导的系统传递（systemic delivery）可以起到沉默的作用，而且在非啮齿动物中完全也没有包括。这里研究人员发现对载脂蛋白B（ApoB）编码的基因施用siRNA，可以降低ApoB蛋白、血清胆固醇和低密度脂蛋白的水平。这为治疗与胆固醇含量高相关的疾病有重要意义，而且进一步说明了RNAi治疗法可以成为一类新型的潜在治疗药物。（生物通:张迪）