定量分子显微技术（Quantitative Molecular Microscopy）

　　

生物通报道：病理学是疾病诊断的最重要的方法之一，主要有细胞病理学（cytopathology）和组织病理学（histopathology）这两个方面，而传统的组织病理学分析方法有其局限性，妨碍了诊断的进行。近期来自耶鲁大学的病理学家Bob Camp和David Rimm利用一种新的演算方法（algorithms）：自动定量分析方法AQUA (Automated Quantitative Analysis)来解决这些问题，这种方法可以将小室特异的染色强度（compartment-specific staining-intensity）数据提升到0到255范围以上。

传统的组织病理学有两个方面的基本问题：首先，it isn't granular enough——病理学研究人员需要用four-point scale对染色标记强度（marker-staining intensity）整体分级；另一方面传统的分析方法有时并不能说明亚细胞结构位置的改变——而这正预示了疾病。Bob Camp和David Rimm的这种方法主要是利用自动定量的方法克服了以上这些缺陷，将染色强度数据提升到0到255范围，而这个范围经证实和完全蛋白浓度直接成比例的。

以雌激素受体（estrogen receptor，ER）为例（见下），用3个标记染色雌激素受体：

细胞角蛋白（cytokeratin 绿色A）——用来区分肿瘤和周边组织
4，6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）（蓝色B）——细胞核染色
雌激素受体抗体（红色C）

首先用cytokeratin给肿瘤组织加上一个“面具”，这样就可确定肿瘤的定位，之后用两种运算方法——RESA (rapid exponential subtraction algorithm)和PLACE (pixel-based locale assignment for compartmentalization of expression)辨认细胞核小室的位置。利用RESA方法可以使得图像B转变成E，图像C转变成G，而PLACE方法确定了细胞小室位置，也可以计算出目的组织（这里指雌激素受体ER）的信号强度。

这样最后通过软件分析就能算出在细胞核和细胞质小室里有多少ER染料，而且这一结果是按照染料强度与小室体积比例呈现的（见下）。

（生物通记者：张迪）