尤霞PNAS文章：蛋白质互作分析新方法

　　

生物通报道：在11月27日的《美国科学院院刊》杂志的网络版上公示了美国加州大学圣塔巴巴拉分校的华裔研究人员尤霞（Xia You，文章第一作者）和同事发表的一篇细胞内蛋白质相互作用图谱分析的最新研究文章。研究人员开发出了一种利用荧光蛋白间的FRET来确定各种细胞类型中的蛋白质相互作用的定量方法。

 

通过将一种靶标受体与FRET接收器、一个大的候选肽配基与一种FRET供体进行基因融合，研究人员能够在大肠杆菌的细胞质中进行最佳的相互作用伴侣的高通量光学筛选。

 

流式细胞仪方法能够确定出能够识别细胞内环境中靶标受体的一组肽配基。对SH3和PDZ的domain-type靶标受体来说，生理学上具有相同意义的序列在分离的配基中很明显。这种相互作用伴侣的相对的分裂常数能够通过对含有FRET杂交的细胞溶解产物进行一系列稀释来测量，从而提供了之前没有记载的、能够排列许多相互作用伴侣之间亲和性的高通量方法。

 

FRET杂交相互作用筛选则为发现细胞中可能对各种真核细胞具有重要意义的蛋白质配基提供了一种强大的工具。（生物通雪花）

 

Published online before print November 27, 2006
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 10.1073/pnas.0605422103

Applied Biological Sciences
Intracellular protein interaction mapping with FRET hybrids

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