Science：三合一新方法，可将DNA正确插入基因组中

　　

生物通记者：P(acman)－一种将DNA插入果蝇基因组的新方法，一种真正意义上实现研究果蝇全基因组结构和功能的方法诞生了！此方法也可用于其它模式生物，如小鼠的研究中。研究结果刊登于近期Science杂志。

Baylor 医学院分子和人类遗传学教授Dr. Hugo Bellen说：“P(acman)克服了现在通用方法的关键障碍，能够在活体条件下研究大片段DNA。” Bellen也是霍华德休斯医学院研究员。这种新技术使研究人员能够在果蝇中研究大片段基因和基因综合体（gene complexes），这在以前是不可能实现的。

P/phiC31人工染色体（artificial chromosome），或称P(acman)，结合了三种最新技术：细菌人工染色体（bacterial artificial chromosome ，BAC，能够使大片段DNA维持在细菌中）、重组技术（recombineering）、能将大片段DNA插入果蝇基因组特定位点的phiC31-介导的转基因技术（phiC31-mediated transgenesis）。

Bellen评价这是一项意义深远的新技术。P(acman)越过了阻碍研究的绊脚石，能够将克隆得到的大片段DNA用于基因组转化，并且保证DNA片段插入基因组特异位点。目前研究基因机构和功能的技术都存在这样那样的问题，比如研究人员培育缺少特定基因的果蝇时，如果想将这种特定基因重新放入基因组中，那么插入位点经常是没有规律的。

有时会产生过多的蛋白，有时又产生的非常少，还有些情况下，这些重新插回的基因会影响其它基因的表达。

“在做这些的时候如同拿苹果和桔子相比，” Bellen。其它技术限于小的DNA片段。“Koen（发育生物学BCM计划一名研究生）利用这三种技术开发新的转基因系统。”

细菌人工染色体（BAC），使科学家能够将大片段DNA维持在细菌中，但是只有一个或少数几个拷贝。然而，细菌在必要时会产生许多DNA拷贝。

因此，Koen添加了重组（recombineering）技术。利用重组技术能够很方便地克隆出大片段DNA，并且可以在基因中的任意位点造成特异突变。

第三种技术能够帮助研究人员在果蝇基因组中寻找有潜力的突变基因，消除苹果－桔子的问题。这第三种技术－phiC31－在小鼠和人类细胞中也可以发挥功能，提示这种新技术具有通用性。（生物通记者 小粥）