研究人员研制出新的蛋白标记和检测系统

　　 

生物通报道：最近，在Los Alamos国家实验室工作的加州大学研究人员通过将一种绿色荧光蛋白“劈开”研制出了一种新的蛋白质标记和检测系统。与现有的蛋白质检测方法不同，这种新方法在生活细胞和检测试管中同样有效，而且检测线低至0.1皮摩尔。由于这种方法能够用于检测活体生物中的蛋白质，因此它将可能用于与疾病有关的蛋白质结构和制造的高通量研究中。这项研究公布在近期的Nature Biotechnology网络版上。

研究人员在文章中叙述了一种用于加工可溶性、可自行连接的绿色荧光蛋白片断的方法。这种荧光蛋白能够用于标记或检测生活细胞或细胞溶解产物中的可溶和不可溶蛋白质，而且不会改变蛋白的溶度。

研究人员认为这一发现将对蛋白质生物技术领域和与确定蛋白质结构和功能的相关工作产生重要影响。这个新系统建构的基础是几年前由Waldo研制出的RPFA（生物通注：Rapid Protein Folding Assay，快速蛋白折叠分析）方法。这种方法通过将目标蛋白的DNA和绿色荧光蛋白(GFP)的DNA融合在一起来工作。由这种连接创造出的杂交蛋白具有了GFP和待分析蛋白的特征。如果这种蛋白被表达出来并正确折叠，那么附着的GFP也能够被正确折叠。如果这种蛋白表达后没有被正确折叠，那么GFP也不能正确折叠并因此无法发出绿色的荧光。研究人员在发现GFP的一些缺陷后，对这一系统进行了改进从而研制出了新的系统。这种新系统利用GFP片断而不是完整GFP。

这项劈开绿色荧光蛋白的研究得益于NIH的研究人员，他们发明了一种加工蛋白折叠和溶解性的经验方法。