一种快速扩增环形DNA的新方法

　　

生物通编译：Molecular Staging公司13日宣布，Molecular Staging和Amersham Pharmacia Biotech 已合作开发了一种简单的滚环扩增法来扩增环形DNA进行测序，几个小时之内环形DNA的拷贝数就可增加10000倍。
Molecular Staging公司的首席运营官Stephen Kingsmore博士说，“这一技术摒弃了冗长的升温期 和传统的纯化DNA程序，将有助于提高DNA测序中心和研究基因组的公司的效率。”

    方法非常简单，仅需几个步骤，即热裂解含有目的基因的生物和一个恒温扩增步骤。

    “Amersham Pharmacia Biotech新的TempliPhiTM DNA 测序模板扩增试剂盒就是基于这个原理，能够大大提高供DNA测序市场使用的模板DNA的制备效率。我们相信这一技术的广泛应用还会另有裨益——节省时间。”

    题为“使用DNA聚合酶Phi29和多引物滚环扩增法迅速扩增质粒和噬菌体DNA”的这篇文章发表在六月份的Genome Research 11:1095-1099上，它描述了一种直接从细菌细胞或病毒噬斑中大量快速扩增环形DNA的方法，这种方法可产生高质量的模板供DNA测序使用，以及制备探针或进行克隆。
Kingsmore博士说，“现在，制备各种各样的环形DNA样品如质粒、噬菌体和线粒体DNA的程序是更简单，更快速，更经济了。”

    Amersham Pharmacia Biotech生产的高保真DNA聚合酶Phi29的使用保证了非常低的错误率，10⁶-10⁷个碱基中仅一个出错。这一特点对精确度极为重要的基因组DNA或cDNA的扩增是非常有价值的。

    这一程序甚至可以有效的扩增DNA环形大分子，如细菌人工染色体（BAC）和粘粒。与PCR不同，这种方法不受扩增对象长度的限制。此外，该程序有望从不可培育的生物和体外获得的不可克隆的环状分子中获得DNA测序模板。它也极大地扩展了自然界中可供研究的生物的数目，从而能分离和研究更多的新基因。（版权所有 转载请注明）