来氟米特对泌乳素瘤抗肿瘤作用的转录组学分析：开拓耐药泌乳素瘤治疗新方向

为探究来氟米特（Leflunomide）对垂体腺瘤尤其是泌乳素瘤的影响，陆军军医大学新桥医院研究人员开展相关研究。结果显示，来氟米特可抑制泌乳素瘤细胞增殖，增强卡麦角林（Cabergoline）疗效，或为耐药泌乳素瘤治疗提供新策略。

　　在医学研究的广阔领域中，泌乳素瘤作为成人功能性垂体腺瘤的常见类型，约占 40 - 45%，给患者带来诸多困扰。它会引发头痛、视觉障碍、垂体功能减退以及高泌乳素血症等问题，严重影响患者的生活质量。目前，多巴胺激动剂如卡麦角林和溴隐亭是治疗泌乳素瘤的一线药物，其中卡麦角林疗效较好且副作用少。然而，令人担忧的是，溴隐亭的耐药率在泌乳素瘤患者中高达 20 - 30%，卡麦角林也有近 10% 的耐药率，这使得寻找新的抗肿瘤药物治疗策略成为迫切需求。

在此背景下，陆军军医大学新桥医院的研究人员开展了一项意义重大的研究。他们聚焦于来氟米特 —— 一种已获批用于治疗类风湿关节炎的二氢乳清酸脱氢酶（DHODH）抑制剂，近年来在多种癌症治疗研究中展现出潜力，但它对垂体腺瘤尤其是泌乳素瘤的作用却尚不明确。该研究旨在评估来氟米特对泌乳素瘤细胞的体内外影响，并深入探究其潜在机制，研究成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员运用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，采用细胞计数试剂盒 - 8（CCK - 8）法检测细胞活力，以此评估来氟米特对细胞增殖的影响。在动物实验中，构建裸鼠荷瘤模型，通过对小鼠接种 MMQ 细胞并分组给药，观察肿瘤生长情况。同时，利用转录组学分析技术，提取细胞 RNA 进行测序，筛选差异表达基因（DEGs），结合基因本体（GO）富集分析、通路富集分析以及蛋白质 - 蛋白质相互作用（PPI）网络分析，深入挖掘来氟米特作用的分子机制。

研究结果如下：

1. 来氟米特对泌乳素瘤细胞系的毒性作用：CCK - 8 实验结果表明，来氟米特在体外能够浓度依赖性地抑制大鼠垂体瘤细胞系 GH₃和 MMQ 的增殖。例如，2μmol/L、4μmol/L 和 10μmol/L 的来氟米特可显著抑制 MMQ 细胞生长（P<0.05），4μmol/L 和 10μmol/L 对 GH₃细胞也有抑制作用（P<0.05）。而且，2μmol/L 来氟米特与 25μmol/L 卡麦角林联合应用时，对 MMQ 细胞的抑制效果明显强于卡麦角林单独使用（P<0.05）。体内实验也证实，来氟米特能抑制 MMQ 细胞衍生肿瘤的生长，并增强卡麦角林的疗效。
2. 来氟米特处理后 MMQ 细胞中的差异表达基因：研究人员鉴定出 101 个上调和 17 个下调的差异表达基因。上调基因与细胞死亡调节（如 Mff、Txnip 和 Phlda3）、膜蛋白（Ptprv）和免疫共刺激分子（Cd80）相关；下调基因涉及 rRNA 生物发生（Nhp2）、细胞内运输（Stx7）、肿瘤（Rmrp 和 Rplp2）和神经元活动（Akap5）等方面。GO 分析显示，差异表达基因显著富集于细胞死亡过程，其中调节凋亡过程和程序性细胞死亡的 Z 评分较高。通路富集分析表明，p53 信号通路显著激活，同时多个信号通路也呈现活跃趋势。此外，研究还发现 26 个细胞死亡相关基因，除 Hk2 外大多上调。
3. 来氟米特处理后枢纽基因的 PPI 网络分析：通过构建 PPI 网络，确定了 Mdm2、Cdkn1a、Plk2 和 Ccng1 等枢纽基因。Mdm2 调节的基因最多，这些枢纽基因在调节细胞衰老和细胞周期过程中发挥重要作用。
4. 卡麦角林及联合治疗对 MMQ 细胞的显著影响：卡麦角林处理组的差异表达基因与细胞死亡过程的正调节和凋亡信号通路相关，且在代谢过程中起关键作用。联合治疗组与卡麦角林组相比，检测到 13 个差异表达基因，联合药物特异性差异表达基因主要富集于抑制蛋白质翻译，但在基因表达过程中活跃，其中 Rplp2 和 hnrnpab 在抑制翻译中起重要作用 。

研究结论与讨论部分指出，来氟米特能有效抑制泌乳素瘤细胞系的增殖，并增强卡麦角林的毒性作用，其机制可能与程序性细胞死亡通路相关。该研究首次证实了来氟米特在泌乳素瘤治疗中的潜力，为耐药泌乳素瘤的治疗提供了新的方向和理论依据。未来，有望基于此研究成果进一步开发新的治疗方案，为广大泌乳素瘤患者带来新的希望。