植物源重组大分子 PAP-IgG Fc:前列腺癌疫苗新希望,强力激发免疫反应
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时间:2025年03月27日
来源:Transgenic Research 2.7
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为探究前列腺癌疫苗,研究人员构建重组 PAP 融合基因 PAP-Fc 和 PAP-FcK,在烟草中表达并纯化。结果显示二者能诱导适应性免疫,为前列腺癌疫苗研发提供了新方向。
前列腺酸性磷酸酶(Prostatic acid phosphatase,PAP)是一种在前列腺癌中高度表达的特异性蛋白。本研究构建了两个重组 PAP 融合基因:与免疫球蛋白 G(IgG) Fc 片段融合的 PAP(命名为 PAP-Fc)以及与内质网滞留序列 KDEL 融合的 PAP-Fc(命名为 PAP-FcK)。利用农杆菌介导转化法获得了表达这些重组大分子蛋白(MPs)的转基因烟草植株,通过基因组 PCR 证实了两个基因的存在。蛋白质免疫印迹(Western blot)分析验证了 PAP-Fc 和 PAP-FcK MPs 的表达,并且它们通过蛋白 A 亲和层析成功纯化。尺寸排阻高效液相色谱显示 PAP-Fc(PAP-FcP)和 PAP-FcK(PAP-FcKP)有二聚体峰。生物透射电子显微镜显示出类似抗体结构的 “Y” 形蛋白颗粒。此外,PAP-FcP和 PAP-FcKP与人类 FcγR 和 FcRn 的结合率很高。用 PAP-FcP和 PAP-FcKP对小鼠进行疫苗接种后,针对 PAP 的总 IgG 增加,CD4+ T 细胞活化增强,与作为阳性对照的接种 PAP 的小鼠效果相当。这些结果表明,两种植物源 MPs 都能有效诱导适应性免疫,是有前景的前列腺癌疫苗候选物。总体而言,表达 PAP-Fc 和 PAP-FcK 的植物是基于抗原大分子的前列腺癌疫苗的可行生产系统。
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