奥马环素对棒状杆菌属的体外活性及检测方法比较研究：为临床治疗带来新希望？

《Antimicrobial Agents and Chemotherapy》：Evaluation of omadacycline in vitro activity against Corynebacterium species

本文评估奥马环素（omadacycline）对 40 株临床棒状杆菌的 MIC，比较肉汤微量稀释法（BMD）和 MTS 检测效果。

　　# 奥马环素对棒状杆菌属的体外活性及检测方法比较研究

一、引言

棒状杆菌属（Corynebacterium spp.）是一类革兰氏阳性、非芽孢形成的杆状细菌。多数从临床样本中分离出的棒状杆菌，如纹带棒状杆菌（C. striatum）、耳垢棒状杆菌（C. aurimucosum）、非发酵棒状杆菌（C. amycolatum）、麦氏棒状杆菌（C. macginleyi）等，通常是皮肤的非致病性菌群，但在免疫功能低下个体、伤口感染以及呼吸机相关性肺炎等情况下，它们可能转变为真正的病原体。像杰氏棒状杆菌（C. jeikeium）与机会性感染相关，解脲棒状杆菌（C. urealyticum）则与泌尿系统感染有关。近年来，棒状杆菌还涉及慢性左心室辅助装置（LVAD）驱动线感染，这类感染往往需要长期的抗生素治疗。

在抗生素治疗选择上，口服抗生素因使用方便、医疗成本低且感染风险小而备受青睐。四环素类抗生素由于副作用较少且对革兰氏阳性菌有抗菌活性，是治疗棒状杆菌感染的潜在口服选择。然而，许多棒状杆菌对四环素类药物（如多西环素）具有耐药性。

奥马环素（omadacycline）是一种新型的口服和静脉用抗生素，它与其他四环素类药物类似，通过与 30S 核糖体亚基结合来抑制细菌蛋白质合成。但目前关于奥马环素对棒状杆菌属的体外活性研究数据有限，也没有相关临床研究，且尚未确立针对棒状杆菌属感染的药敏解释标准（折点）。鉴于其他四环素类药物耐药情况严重（部分数据集显示高达 75% 的菌株耐药），评估奥马环素的活性可能会为临床提供更多的口服治疗选择。此外，奥马环素能避开常见的四环素类耐药机制，如外排泵和核糖体保护机制，理论上对四环素耐药的棒状杆菌属可能仍有活性。

在抗生素敏感性测试（AST）中，肉汤微量稀释法（BMD）被视为金标准，但该方法资源消耗大，需要专业培训和特定材料，在许多临床实验室难以常规开展。自动化仪器虽有预定义的检测面板，比手动 BMD 更快，但新抗生素可能多年都无法整合到这些面板中。因此，实验室在检测新抗生素时，常依赖手动方法，如最低抑菌浓度（MIC）测试条（MTS）或纸片扩散法。不过，临床和实验室标准协会（CLSI）目前不推荐对棒状杆菌属进行纸片扩散法检测，E - tests 虽可用于棒状杆菌属检测，但仅用于研究，且文献报道其性能参差不齐，限制了广泛应用。虽然有研究表明 MTS（尤其是 E - tests）与参考方法相比表现良好，但针对特定药物的 MTS 性能仍存在担忧。此前有研究对比 MTS 和 BMD 检测棒状杆菌属时发现，不同抗生素的总体基本一致率（EA，即与参考 BMD MIC 相差在 ±1 倍稀释范围内的一致性）存在差异。

基于以上背景，本研究的主要目的是评估奥马环素对临床分离的重要棒状杆菌属菌株的体外活性，次要目的是比较 MTS 与标准 BMD 方法的检测性能。

二、研究方法

研究人员收集了 2022 年至 2024 年期间通过质谱鉴定的 40 株临床分离菌株。这些菌株均来自临床医生要求进行药敏试验的样本，意味着它们与临床感染的相关性较高，不过并非所有样本最终都进行了全面的 AST 检测。样本来源主要是伤口培养（28 例），多来自安装 LVAD 或其他植入式装置的患者，其次是血液（5 例）、角膜（5 例）和呼吸道培养（2 例）。对部分分离菌株进行常规药敏试验发现，它们对万古霉素、利奈唑胺和达托霉素的敏感性为 100%，但对口服药物的敏感性较低，如环丙沙星（28% 敏感）、多西环素（86% 敏感）、四环素（40% 敏感）、青霉素（12% 敏感）、克林霉素（12% 敏感）。

将分离菌株送至参考实验室（Laboratory Specialists Inc., OH），按照 CLSI 方法，采用 BMD 进行 MIC 检测，每份样本重复检测 3 次。检测使用阳离子调整的 Mueller Hinton 肉汤，并添加 2.5% - 5% 裂解马血的冷冻检测板，记录 MIC 结果，并依据标准 CLSI 方法计算 MIC₅₀、MIC₉₀和 MIC 范围。

在本机构内，研究人员依据 CLSI 指南（CLSI M07），采用 MTS 对菌株进行重复 3 次的检测。首先制备 0.5 McFarland 的标准化细菌悬液，均匀涂布在血 Mueller - Hinton 琼脂平板（Becton Dickinson）上，然后与 Liofilchem MTS（Liofilchem, Roseto degli Abruzzi, Italy）共同孵育。每次检测由不同技术人员操作，按照制造商说明，将椭圆形抑菌圈与 MTS 相交处的浓度定义为 MIC。实验选用肺炎链球菌 ATCC 49619 菌株作为 BMD 和 MTS 检测的质量控制菌株。

研究中定义基本一致率（EA）为与参考 BMD MIC 相差在 ±1 倍稀释范围内的一致性，并采用 Wilson Score Interval 计算置信区间。

三、研究结果

通过 BMD 检测，奥马环素对棒状杆菌属的 MIC₅₀为 0.5 μg/mL，MIC₉₀为 1 μg/mL，MIC 范围是 0.12 - 2.0 μg/mL。MTS 检测得到的相关数据与 BMD 检测结果相比，基本一致率（EA）为 87.5%（95% 置信区间：73.0% - 95.4%）。但由于样本量较小，该结果未达到统计学显著性。这一发现与之前文献中报道的 BMD 和 MTS 检测棒状杆菌属多数抗生素时 EA 低于 90% 的情况相似，不过造成这种差异的原因尚不完全明确。

针对其他革兰氏阳性菌，奥马环素的敏感折点范围为≤0.12 μg/mL 至≤0.5 μg/mL。本研究中针对棒状杆菌属的低 MIC₅₀值表明，奥马环素可能是一种潜在有效的口服治疗选择。然而，目前还需要更多数据来确定在此 MIC 范围内的奥马环素是否与治疗棒状杆菌属感染的临床成功相关。

四、研究结论与展望

本研究是目前最大规模的关于奥马环素对棒状杆菌属体外活性的研究。但在比较 BMD 和 MTS 检测方法时，并未达到超过 90% 的基本一致率。后续研究需要更大规模的多中心数据集、更广泛的地理代表性样本以及临床结局数据，以此来明确奥马环素 AST 检测在治疗棒状杆菌属感染中的临床和微生物学意义。

虽然奥马环素展现出了对棒状杆菌属的体外抗菌潜力，但在临床广泛应用之前，还需进一步探索其实际疗效、安全性以及与现有治疗手段的对比优势。未来的研究可以聚焦于不同地理区域、不同感染类型以及不同耐药背景下奥马环素的抗菌效果，同时优化检测方法，提高检测的准确性和可靠性，为临床治疗棒状杆菌属感染提供更有力的依据。