一种快速检测蜜蜂寄生螨的新方法——“快速幼虫巢盖揭除法”

《Apidologie》：A scientific note on ‘Rapid brood decapping’—a method for assessment of honey bee (Apis mellifera) brood infestation with Tropilaelaps mercedesae

本研究为解决蜜蜂寄生螨Tropilaelaps mercedesae检测方法的局限性问题，研究人员开展了一种基于蜡条揭除封盖幼虫巢的新型检测方法研究，结果表明该方法检测效率超过90%，且对蜜蜂幼虫存活率影响小，具有重要的应用价值

　　蜜蜂作为一种重要的经济昆虫，在农业生产中发挥着不可替代的作用。然而，近年来蜜蜂寄生螨Tropilaelaps mercedesae的扩散对蜜蜂健康构成了严重威胁。这种寄生螨原寄生于亚洲大蜜蜂，但目前已广泛侵染西方蜜蜂Apis mellifera，并且有向西扩散至欧洲的趋势。传统的检测方法存在劳动强度大、成本高、效果不佳甚至对蜂群具有破坏性等问题，因此迫切需要一种更高效、低成本且对蜂群影响小的检测方法。

为了解决这一问题，来自多个国家的研究人员组成的研究团队开展了一项创新性研究，提出了一种名为“快速幼虫巢盖揭除法”的新方法。该方法基于Tropilaelaps mercedesae螨虫的生物学特性，利用蜡条快速揭除封盖的工蜂幼虫巢细胞，通过观察和计数浮出的成螨来检测螨虫的侵染情况。研究结果表明，这种方法的检测效率超过90%，并且对幼虫的存活率影响较小，平均存活率达到93.8%。这一成果为蜜蜂寄生螨的检测和监测提供了一种可靠的新工具，对于蜜蜂养殖和相关研究领域具有重要意义，该研究发表在《Apidologie》杂志上。

在研究过程中，研究人员采用了以下主要关键技术方法：首先，选择处于白眼至紫眼蛹发育阶段的封盖工蜂幼虫巢细胞，使用商业蜡条（Veet）覆盖超过250个巢室，并轻轻按压10秒使其粘附，随后迅速揭除蜡条，使幼虫巢盖被揭除。接着，使用Honor 90手机摄像头在上方支架上对揭除后的整个幼虫巢区域进行60秒的即时录像，以拍摄和检测出现的螨虫。之后，将揭除后的幼虫巢区域和封盖工蜂幼虫巢背面（对照巢室）切割下来，小心记录在切割幼虫巢样本过程中离开揭除区域的螨虫。将切割的巢框紧密包裹在白色纸巾中，放入Ziploc样品袋中，带到实验室，在?20℃下冷冻，以便在显微镜下检查幼虫的侵染情况。最后，通过双目立体显微镜（Carl Zeiss Stemi 508，放大倍数×6.3）检查每个巢样两侧的巢室内容物，评估Tropilaelaps mercedesae的侵染情况。

在研究结果方面，研究人员通过对2024年夏季在格鲁吉亚的3个蜂场中30个被Tropilaelaps mercedesae侵染的Apis mellifera蜂群进行实验，发现平均检查了200.9个揭除后的幼虫巢室（范围146-241）和202.9个之前未开启的对照巢室（范围151-253）。在28个样本中，11个（39.3%）对Tropilaelaps mercedesae呈阳性，其中9个样本（81.8%）同时侵染了Tropilaelaps mercedesae和Varroa destructor，2个样本（18.2%）仅侵染了Tropilaelaps mercedesae。揭除后的细胞中Tropilaelaps mercedesae的侵染水平（包括视频观察到的螨虫）平均为3.05%。此外，研究人员还发现视频观察与实验室确认的阳性样本之间存在显著正相关（r=0.89），视频观察到的螨虫数量与对照巢室中的螨虫数量之间也存在显著正相关（r=0.96）。不同观察者之间观察到的螨虫数量没有显著差异，表明该方法适用于不同经验水平的养蜂人和蜜蜂专家。此外，该方法对Varroa destructor的检测效果不佳，但对Tropilaelaps mercedesae的检测效果良好。

在讨论部分，研究人员指出，尽管Tropilaelaps mercedesae螨虫移动迅速，确定其离开的具体巢室较为困难，但通过假设每个螨虫来自一个巢室，可以简化数据分析。此外，该方法对蜜蜂幼虫存活率的影响较小，平均存活率达到93.8%，与Siceanu（1997）使用蜡布揭除法作为Varroa destructor控制方法时报告的97.4%的存活率相似。研究人员还提到，该方法具有进一步改进的潜力，例如通过机器学习和移动设备集成来提高检测效率。鉴于Tropilaelaps属物种之间的生物学相似性，该方法可能适用于整个属的检测。未来的研究需要进一步验证和完善这一方法，以应对Tropilaelaps mercedesae向西扩散的挑战。