新型 LAMP 检测法:精准快速狙击水稻稻瘟病菌

《Journal of Plant Pathology》:Colorimetric on-site detection of Bipolaris oryzae in rice seeds and its ecological monitoring through Loop-mediated Isothermal Amplification assay

【字体: 时间:2025年03月20日 来源:Journal of Plant Pathology 2.2

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  研究人员开发 LAMP 检测法检测水稻稻瘟病菌(Bipolaris oryzae),快速且灵敏,助力病害防控。

  稻瘟病菌(Bipolaris oryzae)是一种主要的水稻种子传播病原体,在全球范围内导致水稻大幅减产。保证种子无病害是控制这种病原体最实际、最经济的方法。传统方法需要较长的培养期,而基于聚合酶链式反应(PCR)的分子诊断则需要专门的设备,不适合现场检测。为了解决这些问题,研究人员开发了一种利用环介导等温扩增(LAMP)的现场诊断方法。LAMP 引物针对稻瘟病菌糖基转移酶家族 90 蛋白的外显子 2 设计。所提出的 LAMP 检测法表现出极高的灵敏度,能够在 60°C 下 30 分钟内检测到低至 10 fg 浓度的稻瘟病菌模板。为评估其特异性,研究人员测试了 22 种不同植物病原体的基因组 DNA,该检测法仅能特异性地检测出稻瘟病菌。研究人员还利用从感染稻瘟病菌的稻田中采集的 10 种杂草对该检测法进行了进一步验证。除了二穗短柄草(Brachypodium distachyon)和小粒虉草(Phalaris minor)外,通过开发的 LAMP 方案在 8 种杂草中证实了稻瘟病菌的存在。此外,该检测法还成功用于检测 13 个水稻品种种子中的稻瘟病菌。这种新型 LAMP 检测法能够快速检测水稻种子、植株和土壤中的稻瘟病菌,因此,它是种子健康实验室、植物检疫站以及现场检测种子和植株中病原体的理想诊断方法。

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