揭秘 (R)- 转氨酶活性与底物识别的关键：活性位点踏板样环的奥秘

为探究底物识别与进入结合口袋机制，研究人员对 (R)- 转氨酶活性位点踏板样环展开研究，发现其影响酶活性和底物识别。

　　在酶工程领域，众多研究致力于改造活性位点，以拓宽底物特异性或增强转氨酶（transaminase）活性。然而，对于底物识别及进入结合口袋的机制，人们知之甚少。转氨酶凭借其卓越的立体选择性和催化效率，在手性胺合成中发挥着关键作用。在本研究中，科研人员探索了活性位点的踏板样环如何通过调节底物通道，影响 (R)- 转氨酶（(R)-ATA）的活性和底物识别。研究人员将活性位点的踏板样环与其他特征明确的转氨酶的环进行交换，表现最佳的变体对 (R)- 苯乙胺（(R)-PEA）的活性提高了 5.2 倍，对异丙胺（IPA）的活性提高了 11.8 倍。此外，部分变体的底物偏好也发生了显著变化。同源建模和分子对接分析有力地证明，踏板样环是 (R)-ATA 底物识别和催化活性的关键决定因素。