优化培养条件提升 Neurturin 在 Rosetta-gami 菌株中的可溶性表达

【字体: 时间:2025年03月19日 来源:Biotechnology Letters 2

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  研究人员利用 Rosetta-gami 菌株生产 Neurturin,优化条件后产量提升 8.6 倍,助力神经退行性疾病治疗。

  神经营养生长因子 Neurturin 被视为神经退行性疾病潜在的治疗或逆转药物。虽然大肠杆菌是重组蛋白表达的合适宿主,但在该菌株中生产含有二硫键的蛋白质(如 Neurturin)时,常伴随着包涵体的形成。在本研究中,研究人员选用了适合二硫键精准形成的 Rosetta-gami 菌株来实现 Neurturin 的可溶性生产。同时,采用响应面法(RSM)探究了异丙基 -β-D - 硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、诱导后时间和温度对 Neurturin 可溶性生产的影响。结果显示,在 26oC、IPTG 浓度为 0.8 mM、诱导 5.5 小时的条件下,Neurturin 产量最高。随后,研究人员利用部分因子设计筛选培养基成分对蛋白质生产的影响,并通过 RSM 设计确定了对总蛋白浓度有显著影响的酵母提取物、胰蛋白胨和 MgSO4的最佳浓度,即胰蛋白胨和酵母提取物均为 15 g/L,MgSO4为 2.2 g/L。最后,在优化条件下进行实验评估该工艺的产量。结果表明,优化后 Neurturin 的产量显著提高,相比正常条件增加了 8.6 倍。

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