从球毛壳菌 W7 中克隆的几丁质酶 Cgchi18：兼具工业与农业应用潜力的新发现

研究人员从球毛壳菌 W7 克隆出 Cgchi18 基因，其表达的蛋白有多种特性，具工农业应用潜力。

　　从生防菌球毛壳菌（Chaetomium globosum）W7 中克隆出一个新的几丁质酶（chitinase）基因，命名为 Cgchi18。在大肠杆菌（Escherichia coli）中表达了含有 535 个氨基酸的重组蛋白 Cgchi18，并利用基于分裂内含肽（split intein）的无柱纯化方法对其进行纯化，纯化倍数达 12.39 倍，回收率为 15.61%。这种约 60kDa 的蛋白在 45°C、pH 5.0 时活性最高。Cgchi18 可被 Mg²⁺和 Ba²⁺激活，但受到 Mn²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Zn²⁺、Ag⁺和 Hg²⁺抑制。Cgchi18 具有高度的底物特异性，仅能水解几丁质及其衍生物中的 β-1,4 - 糖苷键，释放出二糖或三糖。在最佳条件下，Cgchi18 降解胶体几丁质的最大反应速度（Vmax）为 8.05 μmol/min/mg，米氏常数（Km）为 3.18 mg/mL。此外，它还表现出抗真菌活性，对病原真菌的菌丝扩展有降解作用。总之，从球毛壳菌中鉴定出的几丁质酶 Cgchi18 在工业和农业领域具有应用潜力。